一、細(xì)胞因子的原理:
(1)由免疫細(xì)胞(如單核、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等)和某些非免疫細(xì)胞(內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞等)經(jīng)刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白質(zhì)。
(2)細(xì)胞因子一般通過結(jié)合相應(yīng)受體調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和效應(yīng),調(diào)控免疫應(yīng)答。細(xì)胞因子(cytokine,CK)是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì),具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫、血細(xì)胞生成、細(xì)胞生長(zhǎng)、APSC多能細(xì)胞以及損傷組織修復(fù)等多種功能。
(3)細(xì)胞因子可被分為白細(xì)胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子等。
二、利用大腸桿菌、酵母菌、昆蟲細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等工程細(xì)胞大規(guī)模生產(chǎn)的細(xì)胞因子。
三、特點(diǎn)分析:
1.真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析;必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE,RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測(cè)其真實(shí)性。
2.純度:應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。
3.生物活性:進(jìn)行相應(yīng)的體外(invitro)或體內(nèi)(invivo)活性檢測(cè)。
4.蛋白含量:通過紫外光譜分析,SDS-PAGE電泳檢測(cè);必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。
5.內(nèi)毒素:kineticLAL法檢測(cè)內(nèi)毒素。
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