氮素是植物生長所必須的大量元素之一,植物吸收的氮主要是無機態(tài)氮,即NO3-或者NH4+,此外也可以吸收某些可溶性的有機氮化物,但植物不能直接把空氣中的氮氣轉化為自身利用,一般在相關酶的作用下合成谷氨酰胺和谷氨酸,然后經過轉氮作用形成不同的氨基酸,再合成蛋白質。高效利用氮素對植物生長有著重要意義,氮的高效利用與很多生理機制密切相關,其中之一就是氮代謝過程中的關鍵酶。
氮代謝是植物體內的基本生理代謝過程之一,包括氮素同化、積累和蛋白質合成等過程,與植物的生長發(fā)育、產量和品質的聯(lián)系非常密切。氮代謝的生理過程是在多種關鍵酶的催化和調節(jié)作用下完成的,包括硝酸還原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸合成酶(GOGAT)、天冬酰胺轉氨酶(AsPAT)等。這些關鍵酶對作物的生長發(fā)育、氮素同化與積累、應對逆境等情況都起著調控作用。
硝酸還原酶(nitrate reductase,NR)是植物氮素同化過程中的第一個酶,也是整個硝態(tài)氮同化過程的關鍵酶、限速酶。植物吸收無機氮化物主要以銨鹽和硝酸鹽為主,吸收銨鹽后可直接用于氨基酸合成,而硝酸鹽需要經過硝酸還原酶進行代謝還原才能被植物利用。硝酸還原酶是一種氧化還原酶,存在于細胞質內或細胞膜外,能將進入植物體內NO3-還原成NO2-,進一步在亞硝酸還原酶的作用下還原為氨。該酶是同源二聚體,每個亞基分子質量約100~110kDa,包含三個功能區(qū),從N-末端到C-末端分別是:鉬輔酶MoCo(硝酸鹽結合與降解區(qū)域),血紅素-Fe(細胞色素b5結合域)和FAD(黃素腺苷酸二核苷酸磷酸、細胞色素b還原酶、NADH或NADPH結合域)。這三個區(qū)域是氧化還原中心,催化電子從NADP或NADPH轉移到硝酸鹽上。這三個結構和功能域通過hingeⅠ和hingeⅡ兩個鉸鏈連接起來。硝酸還原酶的活性高低直接影響到植物對土壤中硝態(tài)氮素的利用,影響作物的產量和品質。張浩瑋等[1]對草地早熟禾的研究中發(fā)現(xiàn),氮積累量與NR活性呈顯著正相關。在施肥條件相同的情況下,蔬菜中的NR活性提高了肥料的利用率,同時蔬菜的產量也有所增加[2]。
硝酸鹽轉運蛋白(nitrate transporter,NRT)是植物根系從土壤中吸收并在植物體內轉運硝酸鹽的關鍵蛋白,對促進作物根系發(fā)育、提高產量具有重要作用,根據其作用環(huán)境的不同分為NRT1蛋白家族和NRT2蛋白家族。NRT1和NRT2兩個家族都由跨膜PH梯度驅動,以協(xié)同轉運機制轉運NO3-和質子H+。植物及作物根系對NO3-的吸收是一個主動吸收的過程,根據動力學特征分為:低親和性的硝酸鹽轉運系統(tǒng)(low-affinity transport system,LATS)和高親和性的硝酸鹽轉運系統(tǒng)(high-affinity transport system,HATS)。低親和性的硝酸鹽轉運系統(tǒng)的吸收速率高,而高親和性的硝酸鹽轉運系統(tǒng)的吸收率低。當外界硝酸鹽濃度大于1 mmol·L-1時,植物利用LATS吸收硝酸鹽;當外界硝酸鹽濃度低于1 mmol·L-1時,植物利用HATS系統(tǒng)吸收硝酸鹽。NRT1是LATS中的組成成分,NRT2是HATS中的組成成分。
細胞中發(fā)生的從硝酸鹽到銨的降解過程分為兩步,第一步是硝酸還原酶將硝酸鹽降解成亞硝酸鹽;第二步為亞硝酸還原酶將亞硝酸鹽降解成銨。隨后在ATP供能下,谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)將谷氨酸和NH4+轉換成谷氨酰胺,該過程是在葉綠體、細胞質或根細胞質體中進行的,最終銨參與到氨基酸的合成。谷氨酰胺合成酶(GS)是“GS-GOGAT循環(huán)”的第一酶,是氮代謝的關鍵酶,植物中GS主要分兩類,GS1為細胞質型,GS2為質體型,它們分布于植物不同的亞細胞結構中及不同組織器官中,在不同的發(fā)育階段發(fā)揮不同的作用。
谷氨酸合成酶(glutamate synthase,GOGAT)是氨同化途徑中關鍵酶,能夠與GS偶聯(lián),共同完成氨同化的過程,可將谷氨酰胺和α-酮戊二酸轉換為兩分子的谷氨酸。谷氨酸合成酶有NADH-GOGAT和Fd-GOGAT兩種類型,前者主要存在于高等植物的光合細胞中,以NADH為電子供體,活性較高,與氮類物質的轉移運輸相關聯(lián);后者在高等植物光合細胞和非光合細胞中均存在,以還原態(tài)的鐵氧還蛋白為電子供體,活性較低。
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貨號 | 品名 | 目錄價 | 優(yōu)惠價 |
AS20 4406 | ALEU | Thiol protease aleurain | 4199 | 2939 |
AS20 4425 | ASN | Glutamine-dependent asparagine synthetase | 4537 | 3176 |
AS09 501 | Cat | Catalase (peroxisomal marker) | 3926 | 2748 |
AS20 4428 | Fd-GOGAT | Ferredoxin-dependent Glutamate synthase | 4199 | 2939 |
AS05 068 | GDH1 | Glutamate dehydrogenase 1 | 5122 | 3585 |
AS08 295 | GLN1GLN2|GS1GS2 glutamine synthetase global antibody | 3926 | 2748 |
AS08 296 | GLN2 | GS2, chloroplastic form of glutamine synthetase | 3926 | 2748 |
AS01 018 | GlnA | Glutamine synthetase | 3926 | 2748 |
AS20 4427 | GltBD | NADPH-dependent glutamate synthase | 4537 | 3176 |
AS20 4426 | Glutamine synthetase (leaf,root) | 4199 | 2939 |
AS07 242 | GOGAT | Glutamine oxoglutarate aminotransferase | 3926 | 2748 |
AS01 021A | NifH | Nitrogenase iron protein | 5512 | 3858 |
AS15 3030A | NodGS | Nodulin / glutamate-ammonia ligase-like protein (affinity purified) | 4433 | 3103 |
AS08 310 | NR | Nitrate reductase, assimilatory | 3926 | 2748 |
AS12 2611 | NRT1,1 | Nitrate transporter 1,1 | 3926 | 2748 |
AS12 2612 | NRT2,1 | Nitrate transporter 2,1 | 3926 | 2748 |
AS12 1873 | NtcA | Global nitrogen regulator | 5369 | 3758 |
AS09 559 | Urease | 3224 | 2257 |
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參考文獻
[1] 張浩瑋,白小明,陳輝,等.草地早熟禾(Poa pratensis)N積累、分配和硝酸還原酶活性對氮、磷肥的響應[J].中國沙漠,2019,39(5):222-231.
[2] MOROZKINA E V,ZVYAGILSKAYA R A.Nitrate reductases:Structure,functions,and effect of stress factors[J].Biochemistry (Moscow),2007,72(10):1151-1160.
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