綠膿桿菌或引起眼藥水致盲，MALDI-TOF助力快速鑒定

導(dǎo)讀

據(jù)中國經(jīng)濟(jì)網(wǎng)近日報(bào)道，美國FDA針對印度某藥企生產(chǎn)的眼藥水發(fā)出警告，該眼藥水可能導(dǎo)致細(xì)菌感染，造成失明甚至死亡。該款眼藥水是人工淚液，用于潤滑眼球。美國疾控中心已確認(rèn)共有55名患者感染了一種罕見綠膿桿菌耐藥菌株，其中5名患者永久性失明，1名患者因血液感染死亡。綠膿桿菌又稱銅綠假單胞菌，是比較常見的一種致病菌，常引發(fā)呼吸道、胃腸道、尿道等感染。專家認(rèn)為，本次感染是由于眼睛可以通過淚管與鼻腔相連，致病菌可以從眼睛進(jìn)入鼻腔，再進(jìn)入血液等其他體液或組織，從而導(dǎo)致疾病。使用島津MALDI-TOF微生物鑒定系統(tǒng)，可以快速鑒定綠膿桿菌，守護(hù)明亮雙眸。

認(rèn)識綠膿桿菌

綠膿桿菌又稱銅綠假單胞菌( Pseudomonas aeruginosa) ，是一種革蘭陰性條件致病菌，抗藥性較強(qiáng)，是一種重要的食源性和水源性致病菌，如蔬菜、水果、瓶裝水、桶裝水中均較常見。同時(shí)也是醫(yī)院內(nèi)常見的引發(fā)慢性感染和急性感染的致病菌之一，嚴(yán)重者可引發(fā)患者肺部功能衰竭以及纖維化囊腫。其引起的感染具有進(jìn)展快、易耐藥、病死率高等特點(diǎn)，所以快速準(zhǔn)確的鑒定銅綠假單胞菌顯得尤為重要。

常見檢測方法

目前，傳統(tǒng)的微生物檢測方法有生化反應(yīng)法和16S rRNA序列分析法。生化反應(yīng)法主要依靠銅綠假單胞菌的生物學(xué)特征，通過分離培養(yǎng)結(jié)合生化檢測等方法對細(xì)菌進(jìn)行鑒定，需經(jīng)過增菌、選擇性分離培養(yǎng)、鑒定等步驟，不僅操作繁瑣、檢測時(shí)間長、費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且容易延誤診斷，難以滿足快速診斷及治療的需要。因此，致病菌的快速鑒定仍是臨床微生物檢驗(yàn)工作者面臨的重要問題。

MALDI-TOF質(zhì)譜法是近年來廣泛用于微生物快速鑒定的方法，微生物都有自身獨(dú)特的蛋白組成, 因而擁有獨(dú)特的蛋白質(zhì)圖譜。細(xì)菌蛋白主要取決于細(xì)菌自身的遺傳因素,  受培養(yǎng)基、培養(yǎng)時(shí)間以及其他培養(yǎng)條件等外部因素的影響較小,  因而具有很好的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。

常見檢測方法比較表

島津解決方案

MALDI-TOF微生物鑒定系統(tǒng)優(yōu)勢

l                      數(shù)據(jù)庫

使用島津MALDI-TOF iDPlus Assurance、Confidence、Performance等多款儀器，采集待測微生物的核糖體蛋白質(zhì)譜圖，與數(shù)據(jù)庫中的標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行匹配檢索，可以快速的進(jìn)行致病菌鑒定。數(shù)據(jù)庫中含有3400種以上微生物的標(biāo)準(zhǔn)圖譜，涵蓋大部分常見細(xì)菌及真菌。同時(shí)還支持用戶自行追加新的標(biāo)準(zhǔn)譜圖，以滿足數(shù)據(jù)庫中未收錄菌種的鑒定需要。

自建庫流程圖（以綠膿桿菌為例）

l                      MALDI-TOF質(zhì)譜法檢測速度快

從質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集到給出鑒定結(jié)果最快只需數(shù)十秒。日常使用只需要基質(zhì)、純水及少量有機(jī)試劑，成本低廉。使用MALDI-TOF專用384孔靶板，可以單次高通量檢測384個(gè)樣品，同時(shí)靶板可重復(fù)使用。

鑒定流程圖

微生物鑒定流程圖

綠膿桿菌鑒定案例

使用MALDI-TOF采集綠膿桿菌質(zhì)譜圖，導(dǎo)入微生物鑒定數(shù)據(jù)庫匹配檢索，可以快速檢測綠膿桿菌。

綠膿桿菌質(zhì)譜圖

綠膿桿菌數(shù)據(jù)庫檢索結(jié)果

結(jié)語

使用島津MALDI-TOF iDPlus微生物鑒定系統(tǒng)采集菌株的核糖體蛋白質(zhì)譜圖,  與數(shù)據(jù)庫比對后,  可以快速獲得綠膿桿菌的鑒定結(jié)果，為科研分析或臨床篩查提供依據(jù)。MALDI-TOF質(zhì)譜法快捷、準(zhǔn)確、成本低，將在致病菌快速鑒定與分析中,  發(fā)揮著越來越大的作用。

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