綠色熒光蛋白的激發(fā)觀察的幾種方法

1. 便攜式紫外光源

采用LUYOR-3410UV便攜式紫外光源（又叫高強(qiáng)度紫外線燈、黑光燈）觀察也非常方便，但如果觀察植物，植物葉片的葉綠色在紫外線燈下也會(huì)發(fā)出熒光，對(duì)gfp發(fā)出的熒光也會(huì)產(chǎn)生干擾，另外，標(biāo)本長(zhǎng)時(shí)間在紫外光源照射下對(duì)GFP標(biāo)本組織也會(huì)造成破壞。

上圖：熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈照射煙草葉片，GFP熒光蛋白在煙草葉片上的表達(dá)

2. 便攜式GFP激發(fā)光源

采用LUYOR-3415RG便攜式GFP激發(fā)光源(又叫熒光蛋白觀測(cè)鏡、熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈）是便捷、方便的觀察方法，因GFP在470nm有一個(gè)很高的吸收峰，采用 470nm激發(fā)光源能夠激發(fā)GFP發(fā)出明亮的綠色熒光，在觀察gfp熒光時(shí)，因?yàn)榧ぐl(fā)光為強(qiáng)烈的藍(lán)色光線，佩戴專業(yè)的觀察眼鏡才能觀察到清晰的熒光信號(hào)。

3、熒光顯微鏡

熒光顯微鏡： 熒光顯微鏡是以紫外線為光源， 用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。 細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。目前在常用的方法就是采用熒光顯微鏡觀察，熒光顯微鏡在實(shí)驗(yàn)室普及。

但熒光顯微鏡的缺點(diǎn)是需要取樣才能觀察，如果樣本過(guò)大，無(wú)法放置在熒光顯微鏡上面，需要破壞樣本進(jìn)行取樣。 觀察植物葉片需要摘取葉片才能觀察。有時(shí)候觀察組培苗，組培苗在組培瓶里面無(wú)法取出，就無(wú)法在熒光顯微鏡下觀察，熒光顯微鏡在觀察熒光時(shí)候還是有很多的局限性。

總之，如果要激發(fā)熒光蛋白的熒光，觀測(cè)熒光蛋白的表達(dá)效果，LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈是相對(duì)理想的觀測(cè)工具，LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈檢測(cè)轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白（GFP）基因、紅色熒光蛋白（DsRed）；檢測(cè)基因植物：水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥；檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因動(dòng)物：小鼠、兔子、猴子等；檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因微生物：細(xì)菌、真菌、酵母等檢測(cè)GFP、DsRed基因組織特異性表達(dá)。上海峰 志儀器為美國(guó)路陽(yáng)授權(quán)代理商，現(xiàn)貨供應(yīng)美國(guó)路陽(yáng)的LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈。

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GFP熒光蛋白在煙草葉片上的表達(dá)