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高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設(shè)備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中做相對運動時，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。HPLC廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)以及環(huán)境研究中。
高效液相色譜儀（HPLC）是一種高效的色譜分析儀器，它的分離效率高于傳統(tǒng)色譜儀，可用于分析不同類型的樣品。高效液相色譜儀通過流動相、固定相和樣品之間的相互作用實現(xiàn)對不同成分的快速分離和定量分析。
高效液相色譜儀的記錄樣品通過檢測器吸光度變化引起的電信號變化，從而產(chǎn)生色譜圖，**結(jié)果取決于后期色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的數(shù)據(jù)處理。以下是兩種常用的高效液相色譜儀數(shù)據(jù)處理方法。光譜處理后可以制作校正曲線。校正曲線是數(shù)據(jù)處理的重點。它是一個標(biāo)準(zhǔn)，使信息和數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)光譜圖處理樣品光譜圖。高效液相色譜儀的校正是通過分析制備的標(biāo)準(zhǔn)樣品來確定計算絕對組分濃度的響應(yīng)系數(shù)的過程。
1.外標(biāo)法：外標(biāo)法是在空白樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為對照樣品，與未知樣品同時進行樣品處理和檢測，并計算出被檢測成分的濃度的定量方法。根據(jù)對照品響應(yīng)值與標(biāo)準(zhǔn)品濃度函數(shù)的關(guān)系，測定未知試樣中的成分。
2.內(nèi)標(biāo)法：內(nèi)標(biāo)法是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加入一定量的被測樣品混合物中，對含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進行高效液相色譜儀分析，測定峰面積和相對含量。分別測定內(nèi)標(biāo)物和受試物的有效校正系數(shù)，并按公式計算受試物的含量。
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