近年來，羊奶市場規(guī)模不斷上升，開發(fā)了品種繁多的羊奶產(chǎn)品，其中羊奶粉是銷量的產(chǎn)品。在原料中摻入牛乳成分是常見的方式，因為牛乳成分相似，成本低，而且容易獲得。近年來，在羊奶及其乳制品的多次抽樣調(diào)查中發(fā)現(xiàn)摻假現(xiàn)象。摻假不僅侵犯了消費者的利益，而且還可能引起食物過敏。因此，開發(fā)一種快速檢測羊奶粉摻假的方法十分重要。

 華南農(nóng)業(yè)大學的沈興課題組聯(lián)合艾迪基因在《Foods》上發(fā)表了題為“A Rapid RPA-CRISPR/Cas12a Detection Method for Adulteration of Goat Milk Powder”的文章，影響因子5.561，本研究建立了一種快速的RPA-CRISPR/Cas12a定性檢測牛源性成分摻假羊奶粉的方法。

本研究采用CRISPR/Cas12a檢測系統(tǒng)結合重組酶聚合酶擴增(RPA)技術對羊奶粉中牛源性成分的摻假進行定性檢測。設計篩選特異性引物和crRNA。在對RPA和Cas體系進行優(yōu)化后，建立了RPA- crispr /Cas12a檢測方法。該檢測無需大型設備輔助，可在45分鐘內(nèi)完成牛源性成分的快速鑒定。

RPA-CRISPR/Cas12a法對牛基因組DNA的檢出率可達10?2 ng/µL，對牛奶粉的檢出率可達1% (w/w)，可滿足現(xiàn)場檢測的檢測要求。

真實樣品測試：共收集55種市售羊奶粉產(chǎn)品進行盲測。結果顯示，27.3%的樣品中摻入了牛成分，顯示出羊奶粉市場摻假情況嚴重。

總結：本研究建立了一種快速的RPA-CRISPR/Cas12a定性檢測牛源性成分摻假羊奶粉的方法。該方法的檢出限能很好地滿足食品監(jiān)測的要求，同時保持了較高的特異性。通過對55種市售山羊奶粉產(chǎn)品的小范圍調(diào)查，發(fā)現(xiàn)目前山羊奶粉摻假情況嚴重。因此，本研究建立的RPA-CRISPR/Cas12a檢測方法非常適合用于羊奶中牛源性成分的現(xiàn)場快速檢測，可為打擊摻假羊奶食品造假提供可靠的技術參考。