1、工作環(huán)境
酶標(biāo)儀是一種精密的光學(xué)儀器,因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,還能夠延長其使用壽命。根據(jù)DIN VDE 0871條例,儀器應(yīng)放置在無磁場(chǎng)和干擾電壓的位置。依據(jù)DIN 45 635 -19條例:
儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下。
為延緩光學(xué)部件的老化,應(yīng)避免陽光直射。
操作時(shí)環(huán)境溫度應(yīng)在15℃-40℃之間,環(huán)境濕度在15%-85%之間。
操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。
操作環(huán)境空氣清潔,避免水汽,煙塵。
保持干燥、干凈、水平的工作臺(tái)面,以及足夠的操作空間。
2、操作注意事項(xiàng)
酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果,因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果,試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測(cè)判斷結(jié)果,操作過程隨意性較大,在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時(shí)糾正操作習(xí)慣,會(huì)造成較大誤差。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項(xiàng):
使用加液器加液,加液頭不能混用。
洗板要洗干凈。如果條件允許,使用洗板機(jī)洗板,避免交叉污染。
嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。
在測(cè)量過程中,請(qǐng)勿碰酶標(biāo)板,以防酶標(biāo)板傳送時(shí)擠傷操作人員的手。
請(qǐng)勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成后請(qǐng)洗手。
如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害,請(qǐng)嚴(yán)格按照試
劑盒的操作說明,以防對(duì)操作人員造成損害。
如果儀器接觸過污染性或傳染性物品,請(qǐng)進(jìn)行清洗和消毒。
不要在測(cè)量過程中關(guān)閉電源。
對(duì)于因試劑盒問題造成的測(cè)量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參數(shù),以達(dá)到最佳效果。
使用后蓋好防塵罩。
出現(xiàn)技術(shù)故障時(shí)應(yīng)及時(shí)與廠家聯(lián)系,切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀。
酶標(biāo)儀及洗板機(jī)選購指南
酶標(biāo)儀(Microplate Reader)是對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(cè)( EIA)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗體或抗原的濃度。
酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,特別在近幾年中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用,使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣泛,同時(shí)促進(jìn)了生殖健康技術(shù)水平提高 。
目前國內(nèi)許多計(jì)生站系統(tǒng)開展了酶免檢測(cè)項(xiàng)目,如:乙肝五項(xiàng)、愛滋病檢測(cè)、優(yōu)生優(yōu) 育系列檢測(cè)、激素檢測(cè)等。過去多數(shù)采用目測(cè)方法,報(bào)出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。例如:某弓形蟲檢測(cè)試劑盒中,臨界值規(guī)定為:陰性對(duì)照品的 OD 值×2.5,通過目測(cè)無法判斷標(biāo)本孔的反應(yīng)顏色是否超過臨界值。肉眼進(jìn)行兩孔之間的顏色比較可能還行,但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。
要求酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀,酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀,并提供酶標(biāo)儀測(cè)定的原始數(shù)據(jù),而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測(cè)的。同時(shí)酶免檢測(cè)的 項(xiàng)目往往是一些實(shí)質(zhì)性的感染和病變(如:肝炎、愛滋病、優(yōu)生優(yōu)育等),判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn),由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝、愛滋等 EIA 試劑檢測(cè)是避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所采用。
我國免疫診斷方法主要有如下三種:酶免(EIA)、放免(RIA)和發(fā)光,在市場(chǎng)上的情況如下:
方法 所處市場(chǎng)周期
放免 衰退期
酶免 成長期
發(fā)光 進(jìn)入期
放免技術(shù)由于試劑的污染和有效期等問題在國際和國內(nèi)市場(chǎng)逐漸被淘汰,而化學(xué)發(fā)光試劑和設(shè)備比較昂貴,使得其在國內(nèi)的普及特別在計(jì)生系統(tǒng)普及需要較長時(shí)間,EIA 技術(shù)穩(wěn)定,試劑價(jià)格合理,供應(yīng)充,酶免技術(shù)在中國市場(chǎng)處于成長期,因此購買酶標(biāo)儀正合適宜。
尤其要提到的是,在中國的計(jì)劃生育和婦幼保健系統(tǒng)配備酶標(biāo)儀已經(jīng)迫在眉睫。早在幾年以前, 世界衛(wèi)生組織已建議對(duì)孕婦進(jìn)行 TORCH五項(xiàng)常規(guī)篩查,但是遺憾的是由于缺乏酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等設(shè)備,RCH的檢測(cè)在中國還未能普遍開展。TORCH 感染在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)中稱為TORCH綜合癥,由于孕婦, 胎兒和新生兒都易被感染, 它已受到婦產(chǎn)科和兒科的極大重視。妊娠期感染不僅危害母體,往往還可對(duì)胎兒和新生兒產(chǎn)生嚴(yán)重影響。通過胎盤可引起子宮內(nèi)感染而導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或胎兒生長遲緩和畸形,通過產(chǎn)道和母乳可引起新生兒感染。如累及神經(jīng)系統(tǒng)可造成不同程度的智力障礙以及各種癱瘓、失聰、失明等嚴(yán)重后遺癥,影響人口素質(zhì),因而 TORCH 感染與優(yōu)生優(yōu)育有極為重要的關(guān)系。因此,RCH(IgG和gM)檢查通常也稱為優(yōu)生優(yōu)育十項(xiàng)檢查。目前,TORCH的檢測(cè)方法主要有放免(RIA)和酶免(EIA)。由于放免方法需要特殊儀器,且有放射危害,目前正被酶免(EIA)方法取代。EIA方法具有特異性強(qiáng),靈敏度高,簡單快速,成本低等優(yōu)點(diǎn),只要配備有酶標(biāo)儀和其他相應(yīng)的設(shè)備 ,多數(shù)普通實(shí)驗(yàn)室均可方便地開展 。 很顯然, 盡快在計(jì)生系統(tǒng)普及酶標(biāo)儀等設(shè)備是一個(gè)迫切的需求。
這項(xiàng)工作的落實(shí)將有助于提高診治水平,降低母嬰發(fā)病率,從而提高整個(gè)國民的健康素質(zhì)。目前市場(chǎng)上提供的EIA試劑越來越多,如:T3、T4、TSH、TORCH 系列、不孕系列、各種癌癥標(biāo)志物、傷寒、副傷寒等,另外通過母嬰傳播的性傳播疾病(如淋病、梅毒、HIV)和肝炎(如HBV、HCV),以及胎兒的抗體,新生兒TSH的測(cè)定,疫苗反應(yīng)等,市場(chǎng)上也都有成套 EIA 試劑盒供應(yīng)。使用酶標(biāo)儀有利于拓展檢測(cè)項(xiàng)目,提高檢測(cè)水平,其社會(huì)效益和 經(jīng)濟(jì)效益并舉。
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