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基因測序儀的技術原理

來源:鄭州澤銘科技有限公司   2023年10月29日 22:13  
基因測序技術也稱作dna測序技術,即獲得目的dna片段堿基排列順序的技術,獲得目的dna片段的序列是進一步進行分子生物學研究和基因改造的基礎。
 
基因測序儀(即DNA測序儀),是一臺能自動灌膠、自動進樣、自動數(shù)據(jù)收集分析等全自動電腦控制的測定基因片段的高檔精密儀器。
 
技術原理:
 
在分子生物學研究中,基因的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。用于測序的技術主要有Sanger等。發(fā)明的雙脫氧鏈末端終止法。Sanger法是根據(jù)核苷酸在某一固定的點開始,隨機在某一個特定的堿基處終止,產(chǎn)生A,T,C,G四組不同長度的一系列核苷酸,然后在尿素變性的PAGE膠上電泳進行檢測,從而獲得DNA序列。Sanger測序法得到了廣泛的應用。
 
Sanger法測序的原理就是利用一種DNA聚合酶來延伸結(jié)合在待定序列模板上的引物,直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構(gòu)成,每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸,并混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3'-OH基團,使延長的寡聚核苷酸選擇性地在G、A、T或C處終止,終止點由反應中相應的雙脫氧而定。

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