原代培養(yǎng)技術的注意事項

一、注意污染

1、嚴格進行動物皮膚消毒，使用三套器械取材。新生動物皮膚先用2%碘酒液消毒，成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。

2、嚴格進行無菌操作，防止細菌、霉菌、支原體污染，避免化學物質(zhì)污染。自取材開始，保持所有組織細胞處于無菌條件。細胞計數(shù)可在有菌環(huán)境中進行。

3、吸取液體前，瓶口和吸管進行火焰消毒；吸取液體時，避免瓶口和吸管碰撞。

4、離心管入臺前，管口、管壁應消毒。

5、實驗者離開超凈臺時，要隨時用肘部關閉工作窗。

6、使用過的器械用酒精棉球擦去血污后，移入另一個器皿中繼續(xù)消毒，在浸泡器械時剪刀口要叉開放，鑷子彎頭要向下放，并加蓋消毒。凡在超凈臺外操作的步驟，各器皿需用蓋子或橡皮塞，以防止細菌落入。

二、器材使用時既要注意用火焰消毒，又要防止燙傷、燙死細胞。經(jīng)火焰消毒后的吸管一定要用Hanks液冷卻。

三、超凈臺內(nèi)溫度、濕度較大，在夏天工作時臺內(nèi)散熱更慢，因此進行細胞懸液混勻、接種時，離火焰要稍微遠些，組織細胞、培養(yǎng)液等不能暴露過久，以免溶液蒸發(fā)。