上海研域生物給大家介紹細(xì)胞的操作過程

我司細(xì)胞包裝內(nèi)包含了ELISA實(shí)驗(yàn)所需的所有試劑和相關(guān)組份，簡單快捷的方案設(shè)計(jì)和優(yōu)化的試劑配比，為全球科研工作者提供ELISA實(shí)驗(yàn)分析方案，試劑盒內(nèi)含有分析所需的所有必需試劑，操作簡單便捷，試劑盒內(nèi)組分經(jīng)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，確保更高的檢測靈敏度。

細(xì)胞是指直接從機(jī)體取出的組織或細(xì)胞獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞。這里的組織主要指：組織器官、外周血及胚胎等。由于細(xì)胞生長緩慢，繁殖一定的代數(shù)停止生長。所以一般認(rèn)為：培養(yǎng)的原代的1代和傳代到10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為細(xì)胞培養(yǎng)?？偨Y(jié)了細(xì)胞的提取的整個(gè)操作過程，一起來看看吧！

細(xì)胞的提取的整個(gè)操作過程：

1.整個(gè)操作要在潔凈通風(fēng)的超凈臺(tái)下進(jìn)行，所有的器材要高壓消毒。

2.根據(jù)BALB/c的體重，用10ml/kg3%濃度的麻醉；置于盛有75%乙醇的燒杯內(nèi)，這一步不僅可以消毒，也可以讓浸濕，后續(xù)剃去皮毛的時(shí)候不會(huì)沾到剪刀或組織上。

3.用鑷子輕輕挑起心臟，裝有PBS的注射器插入心尖，同時(shí)在右心耳處剪開一個(gè)小口，緩慢推動(dòng)注射器，隨著心臟的跳動(dòng)，將體內(nèi)的血液沖洗出來。

4.取出肺部組織，細(xì)胞將肺組織切成小米粒樣的大小，置于預(yù)冷的HBSS中反復(fù)沖洗幾次。

5.將小米粒大小的肺組織置于培養(yǎng)瓶中（培養(yǎng)瓶前一天用1%明膠溶液包被培養(yǎng)面，4度過夜，處理前，將培養(yǎng)瓶放置培養(yǎng)箱中，使其溫度恢復(fù)至37度），置于培養(yǎng)箱37度的環(huán)境下，消化4個(gè)小時(shí)。

6.消化4小時(shí)后，加入RPMI1640培養(yǎng)基（有10%血清、1%雙抗、1%內(nèi)皮細(xì)胞生長因子）10ml（添加培養(yǎng)基，可以是正常培養(yǎng)時(shí)的2倍量），繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)（繼續(xù)培養(yǎng)的時(shí)間可根據(jù)細(xì)胞貼壁情況適當(dāng)調(diào)整）。

7.24小時(shí)后，取出肺組織，鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)，換液。

8.細(xì)胞的提取和培養(yǎng)是很慢的過程，一般需等到24小時(shí)后，才能在鏡下看到些許細(xì)胞群，一周到兩周后才會(huì)看到鵝卵石樣的排列情況。

9.細(xì)胞2-3天換液一次，因?yàn)閮?nèi)皮細(xì)胞生長形成單層時(shí)，會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象。所以，內(nèi)皮細(xì)胞生長接近單層時(shí)就可以傳代了，不要等到長得非常滿。

上海研域生物細(xì)胞一路走來依靠豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、具競爭力的價(jià)格的優(yōu)勢等成為試劑行業(yè)的遙遙先者。當(dāng)然這些都離不開大家的支持！