中藥配方顆粒標(biāo)準(zhǔn)中“燙水蛭（螞蟥）配方顆粒的檢測”，使用迪馬色譜柱

【來源】本品為水蛭科動物螞蟥Whitmania pigra Whitman的干燥全體經(jīng)炮制并按標(biāo)準(zhǔn)湯劑的主要質(zhì)量指標(biāo)加工制成的配方顆粒。

【制法】取燙水蛭（螞蟥）飲片4000g，加水煎煮，濾過，濾液濃縮成清膏（干浸膏出膏率為12.0%-20.0%），加入輔料適量，干燥（或干燥，粉碎），再加入輔料適量，混勻，制粒，制成1000g，即得。

【性狀】本品為淺灰綠色至棕綠色的顆粒；氣微，味酸。

【特征圖譜】照高效液相色譜法（中國藥典2020年版通則0512）測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗    以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（柱長為250mm，內(nèi)徑為4.6mm，粒徑為5µm）；以乙腈-0.2%磷酸（0.5:99.5）為流動相；柱溫25℃；流速為每分鐘0.8mL；檢測波長為270nm。理論板數(shù)按次黃嘌呤峰計算應(yīng)不低于5000。

參照物溶液的制備    取水蛭（螞蟥）對照藥材1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入水20mL，加熱回流60分鐘，取出，放冷，離心處理（轉(zhuǎn)速10000r/分鐘）10分鐘，取出，取上清液濾過，作為對照藥材參照物溶液。另取次黃嘌呤、尿嘧啶對照品適量，加10%甲醇制成每1mL各含0.2mg的混合對照品溶液，作為對照品參照物溶液。

供試品溶液的制備    取本品適量，研細，取約0.3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加水10ml，超聲處理（功率250W，頻率53kHz）10分鐘，取出，放冷，離心處理（轉(zhuǎn)速10000r/分鐘）10分鐘，取出，取上清液濾過，即得。

測定法    分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各10µL，注入液相色譜儀，測定。

供試品色譜中應(yīng)呈現(xiàn)5個特征峰，并應(yīng)與對照藥材參照物色譜中的5個特征峰的保留時間相對應(yīng)，其中峰2、3分別應(yīng)與尿嘧啶、次黃嘌呤參照物峰的保留時間相對應(yīng)，與次黃嘌呤參照物相應(yīng)的峰為S峰，計算特征峰1、4、5與S峰的相對保留時間，其相對保留時間應(yīng)在規(guī)定值的±10%范圍之內(nèi)。規(guī)定值為：0.51（峰1）、1.41（峰4）、1.82（峰5）。