cortecnet的大腸桿菌蛋白表達簡介

細菌中的蛋白質(zhì)表達是迄今為止制備穩(wěn)定同位素富集蛋白質(zhì)樣品的常用方法。大腸桿菌是表達重組蛋白常用的生物體，是一種培養(yǎng)時間短的宿主。大腸桿菌能夠使用簡單的分子技術(shù)進行直接的基因操作，并且細胞對氘表現(xiàn)出良好的耐受性，從而可以使用13 C、 15 N 和2 H

在厭氧條件下，大腸桿菌可以使用葡萄糖、乙酸鹽和甘油作為其碳源以及銨鹽作為其氮源來合成所有 20 種必需氨基酸。使用標記的基本介質(zhì)試劑，例如氧化氘、 15 N 銨鹽、 13 C 6、D 7或13 C 6 /D 7標記的葡萄糖，可以直接生產(chǎn)均勻標記的蛋白質(zhì)樣品。

使用相應的標記試劑獲得均勻的標記

I SOGRO 是一種源自藻類裂解物的復雜粉末狀豐富培養(yǎng)基，旨在增強細菌中的蛋白質(zhì)表達。 ISOGRO 粉末具有13 C、 15 N 和2 H 標記的各種組合，可用作獨立培養(yǎng)基或基本培養(yǎng)基的補充，以提高蛋白質(zhì)產(chǎn)量。

A。 p38 生長的 SDS-PAGE。數(shù)據(jù)由美國大學化學/生物化學系 Jeffrey W. Peng 博士提供美國印第安納州圣母院。 b. pLysS 中的心肌肌鈣蛋白 cTnC(1-89)。細胞在 37°C 搖瓶中生長。紅色曲線是 ISOGRO 補充的最小介質(zhì)，黑色曲線是單獨的最小介質(zhì)。

如果使用大腸桿菌無法成功進行蛋白質(zhì)表達，則可以考慮其他選擇，例如昆蟲細胞、哺乳動物細胞或無細胞表達系統(tǒng)。