一、為什么需要進(jìn)行柱平衡?
· 置換色譜柱內(nèi)儲(chǔ)存的溶劑
· 在流動(dòng)相和固定相之間建立平衡
· 濕潤(rùn)固定相以實(shí)現(xiàn)分析物的分配
· 產(chǎn)生可靠的結(jié)果。
二、色譜柱沒(méi)有平衡好會(huì)產(chǎn)生何種影響?
·基線波動(dòng)
·保留時(shí)間變化
·峰形變形
·分離度變差
·響應(yīng)異常
·產(chǎn)生鬼峰。
三、哪些因素影響色譜柱平衡?
- 固定相性質(zhì):具有龐大基團(tuán)或空間位阻的固定相(例如苯基柱)可能需要更長(zhǎng)的柱平衡時(shí)間。
- 表面積:具有較低表面積的固定相有利于更快的柱平衡。
- 孔徑大?。壕哂休^寬孔徑(因此表面積較低)的固定相有利于更快的柱平衡。
-流動(dòng)相組成:具有較高濃度的緩沖鹽和離子對(duì)試劑的流動(dòng)相需要更長(zhǎng)的平衡時(shí)間。
-水相的比例:如果流動(dòng)相中的水相含量較高,柱平衡時(shí)間可能較長(zhǎng)。
-柱溫:較高的柱溫會(huì)加速柱平衡,因?yàn)榉肿舆\(yùn)動(dòng)加快(黏度降低)。
-梯度洗脫中的緩沖鹽濃度:通過(guò)在兩個(gè)流動(dòng)相瓶中加入緩沖鹽溶液,以保持洗脫過(guò)程中緩沖鹽濃度的穩(wěn)定,有助于加快洗脫過(guò)程中的柱平衡速度。
注意:在平衡過(guò)程的開(kāi)始階段應(yīng)避免使用緩沖鹽:有機(jī)相,而是使用比例相符的水:有機(jī)溶劑,然后再使用初始流動(dòng)相平衡。
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