1、色譜柱安裝與平衡
使用經(jīng)過濾并脫氣的流動相(不含任何緩沖液)沖洗HPLC泵和管線,確保系統(tǒng)中沒有氣泡。按照流向標簽(位于色譜柱上)指示的方向?qū)⑸V柱一端連接至進樣器,另一端不接檢測器。將泵流速設(shè)置為0.1mL/min(或系統(tǒng)允許Z低設(shè)置)并在5分鐘內(nèi)增大至正常流速。當色譜柱出口處有溶劑自由流出時停止泵送,擦拭出口端并將其連接到檢測器。以正常流速和約 10-30倍色譜柱體積的流動相來平衡色譜柱。
2、檢測柱效
建議用戶在收到Kromasil色譜柱15天內(nèi)進行柱效檢測,并在整個使用周期內(nèi),進行定期的柱效測試,以便隨時監(jiān)測色譜柱的壽命情況。
3、運行參數(shù)
工作壓力上限=400Bar(~6000psi)。
工作溫度上限=60℃。
在使用Kromasil Classic系列C4、C8、C18、Phenyl色譜柱時,建議將流動相的pH值控制在1.5-9.5之間,這樣有利于延長柱子的使用壽命。
4、流動相的配置
僅使用HPLC色譜純?nèi)軇⑺?、高純度的化學品和試劑使用前要對所有流動相進行過濾和脫氣確保溶劑可互溶。
5、貯存
色譜柱使用完畢后,應(yīng)盡可能地沖洗掉殘留在色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)和沉積物。保存在適合的儲存溶劑中,儲存溶劑可以參考COA中建議使用溶劑。儲存環(huán)境需保持溫度穩(wěn)定、避光,并注意檢查Peek堵頭,防止松動導致柱內(nèi)溶劑流失。
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