納米抗體介紹|單域抗體生產(chǎn)|納米抗體制備-泰克生物

抗體是與抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白，由B細(xì)胞分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生，存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中，及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面?？贵w由2條相同重鏈（H鏈）和2條相同的輕鏈（L鏈）組成，重鏈較長，相對(duì)分子量較大，而輕鏈較短，相對(duì)分子量較小，抗體呈Y字形對(duì)稱結(jié)構(gòu)。

納米抗體（nanobodies，Nbs）是由比利時(shí)科學(xué)家Hamers等人在駱駝血液內(nèi)發(fā)現(xiàn)的一種新型抗體，與傳統(tǒng)抗體相比，納米抗體（單域抗體）不存在輕鏈，只有重鏈可變區(qū)（VHH）和兩個(gè)常規(guī)的CH2和CH3區(qū)組成，分子量只有15 KDa左右，因此被稱為納米抗體，是目前已知的可結(jié)合目標(biāo)抗原的最小單位。

納米抗體具有的結(jié)構(gòu)優(yōu)勢：

1. 相對(duì)分子質(zhì)量小與免疫原性低

Nbs的骨架區(qū)（FRs）與人類VH區(qū)的序列同源性超過80%，并且它們的三維結(jié)構(gòu)能夠重疊。已經(jīng)在小鼠體內(nèi)證明，Nbs因與傳統(tǒng)的VH區(qū)具有高度的同源性，而且具有很高的構(gòu)象穩(wěn)定性，使得其免疫原性很低。

2. 可溶性好

Nbs的VHH與傳統(tǒng)抗體的VH存在一些重要的不同，與VH相比，VHH骨架區(qū)2（FR2）的4個(gè)氨基酸殘基（V37F或V37Y、G44E、L45R、W47G）被替換，這4個(gè)氨基酸是親水性的，因此使得Nbs的表面更親水，增加了它的水溶性。

3. 抗原識(shí)別能力強(qiáng)

與傳統(tǒng)的VH類似，VHH包括4個(gè)FRs和3個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)（CDRs）。與VH相比，VHH的CDR1與CDR3更長，CDR3與CDR1或FR2的半胱氨酸殘基結(jié)合是通過二硫鍵實(shí)現(xiàn)的，這樣使得其結(jié)構(gòu)非常穩(wěn)定。傳統(tǒng)的Fab片段和典型的單鏈抗體（scFv）只能識(shí)別表面抗原，因?yàn)樗鼈兊目乖Y(jié)合位點(diǎn)是凹陷或平面的。而VHH有一個(gè)主要由CDR3環(huán)組成的凸出的抗原決定簇，可以結(jié)合凹進(jìn)去的抗原表位，因此Nbs能夠特異性識(shí)別一些隱藏的抗原表位，而這些表位是傳統(tǒng)抗體無法識(shí)別的。所以Nbs比scFv抗體結(jié)合部位更適合結(jié)合抗原表面的凹槽部分，例如酶的催化反應(yīng)位點(diǎn)，從而阻斷其催化活性。

4. 穩(wěn)定性高

Nbs能夠形成不同的構(gòu)象模式來保護(hù)氨基酸的穩(wěn)定性。在高溫或極酸極堿環(huán)境條件下，普通的多聚抗體會(huì)暴露出疏水表面，形成大分子發(fā)生沉淀，失去原來的正常功能；而納米抗體在化學(xué)及熱變性后可以重新折疊，通過在CDR1與CDR3間重新形成一個(gè)二硫鍵，結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，保障了其功能活性的穩(wěn)定。

5. 穿透性強(qiáng)

Nbs能夠穿透血腦屏障。研究證實(shí)，用駱駝來源的Nbs免疫腦血管內(nèi)皮細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)Nbs能夠通過轉(zhuǎn)胞吞作用，在血管內(nèi)皮細(xì)胞的基底外側(cè)釋放。體外研究表明納米抗體能夠穿透血腦屏障，并且能攜帶M13噬菌體顆粒等一些物質(zhì)到達(dá)腦部。

6. 易于生產(chǎn)

納米抗體由于其結(jié)構(gòu)簡單、相對(duì)分子質(zhì)量小且沒有糖基化，易于在酵母表達(dá)系統(tǒng)和原核表達(dá)系統(tǒng)等蛋白表達(dá)系統(tǒng)中大量表達(dá)。納米抗體生產(chǎn)成本較低，易于推廣和應(yīng)用。

納米抗體憑借優(yōu)勢在基礎(chǔ)研究、疾病診斷與治療方面應(yīng)用廣泛，一些已進(jìn)入臨床Ⅰ期或Ⅱ期試驗(yàn)，包括腫瘤學(xué)、神經(jīng)學(xué)及免疫學(xué)等。此外，Nbs還可用于病毒檢測與診斷，例如HIV、牛痘病毒、青猴病病毒及登革熱等；納米抗體在環(huán)境污染物、生物毒素等小分子化合物的檢測中方面也有所應(yīng)用，提高了檢測的靈敏度和操作的簡便性；此外，納米抗體在食品毒理學(xué)研究、食品分析檢測等方面也有一些研究和應(yīng)用，例如有研究表明一些Nbs可以和細(xì)菌進(jìn)行結(jié)合，抑制細(xì)菌的產(chǎn)酶能力，從而發(fā)揮一定的治療作用。

泰克生物致力于羊駝VHH納米抗體的生產(chǎn)已有多年時(shí)間，并擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，可為廣大客戶提供專業(yè)的納米抗體制備服務(wù)。泰克生物具有穩(wěn)定的哺乳動(dòng)物CHO細(xì)胞和原核細(xì)胞納米抗體制備平臺(tái)，能夠?yàn)榭蛻籼峁目贵w序列分析、linker設(shè)計(jì)、標(biāo)簽選擇設(shè)計(jì)、載體選擇設(shè)計(jì)到重組納米抗體表達(dá)條件的摸索和優(yōu)化，重組抗體純化等一站式服