脂質(zhì)配方的性質(zhì)取決于具體成分(陽離子、陰離子和中性脂質(zhì))。
但是,同一種制備方法適用于所有成分的脂質(zhì)囊泡。制備流程的一般要素包括制備用于水合的脂質(zhì)、攪拌水合以及減小粒徑,從而獲得均勻分布的囊泡。
今天介紹制備用于水合的脂質(zhì):
當(dāng)用混合脂質(zhì)成分制備脂質(zhì)體時,必須先溶解脂質(zhì)并混合于有機(jī)溶劑中,以確保獲得均勻的脂質(zhì)混合物。
通常,該過程使用氯仿或氯仿:甲醇混合液完成。
目的在于使脂質(zhì)混合,獲得澄清的脂質(zhì)溶液。
一般情況下,脂質(zhì)溶液的制備濃度為10-20mg脂質(zhì)/ml有機(jī)溶劑,但是,在脂質(zhì)溶解度和混合程度可接受的情況下,也可使用更高濃度。
一旦脂質(zhì)充分混合于有機(jī)溶劑中,則除去溶劑以產(chǎn)生脂質(zhì)薄膜。如有機(jī)溶劑較少(< 1mL),可在通風(fēng)櫥內(nèi)使用干燥氮?dú)饬骰驓鍤饬髡舭l(fā)溶劑。
如有機(jī)溶劑較多,應(yīng)通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑,從而在圓底燒瓶內(nèi)壁形成脂質(zhì)薄膜。
將樣品瓶或燒瓶放在真空泵上過夜,去除殘留有機(jī)溶劑,使脂質(zhì)薄膜干燥。如果對使用氯仿有異議,也可以選擇使用叔丁醇或環(huán)己烷溶解脂質(zhì)。
將脂質(zhì)溶液轉(zhuǎn)移到容器中,并將容器放在干冰塊上或在干冰-丙酮或酒精(乙醇或甲醇)浴中旋轉(zhuǎn),使其凍結(jié)。
使用酒精浴時,應(yīng)確認(rèn)容器能夠承受突然的溫度變化而不發(fā)生破裂。
隨后,將凍結(jié)的脂質(zhì)結(jié)塊放到真空泵上凍干,直至干燥(1-3天,具體取決于溶劑體積)。
脂質(zhì)結(jié)塊的厚度不應(yīng)超過凍干容器的直徑。
干燥的脂質(zhì)薄膜或結(jié)塊可從真空泵上取下,將容器牢固密封并冷凍儲存,直至用于水合。
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