優(yōu)質生鮮奶的分為特優(yōu)級、優(yōu)級、良級和合格級四個等級,而分級的依據主要是檢測判斷鮮奶是否品質高的4個核心指標數值,即乳脂率、乳蛋白率、菌落總數和體細胞數。在奶業(yè)發(fā)達國家的標準里,上述四個核心指標的數值基本要達到牛奶中的乳脂肪含量不低于3.3%,乳蛋白含量不低于3.0%,體細胞數不超過75萬個/ML,菌落總數不超過10萬CFU/ML。以下是使用恒溫恒濕培養(yǎng)箱測定純牛奶菌落總數的一般步驟:
1. 取樣:取10ml純牛奶置盛有90ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質袋中,用拍擊式均質器拍打1-2分鐘,制成1:10的樣品勻液。
2. 配制濃度梯度:用1ml無菌吸管或移液槍吸取1:10樣品勻液1ml,沿管壁緩慢注于盛有9ml稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭不要觸及稀釋液面),用漩渦震蕩器混合均勻,制成10-2的樣品勻液。按上述操作程序,制備10-3、10-4系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1次1ml無菌吸管或吸頭。
3. 接種:取一定量的稀釋液,使用無菌技術將其接種到適當的培養(yǎng)基上。常見的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂或平板計數瓊脂。
4. 培養(yǎng):將接種后的培養(yǎng)基放入恒溫恒濕培養(yǎng)箱中,設置適宜的溫度和濕度條件。一般培養(yǎng)溫度為 37°C,培養(yǎng)時間根據培養(yǎng)基和檢測要求而定,通常為 24-48 小時。
5. 計數:培養(yǎng)結束后,觀察培養(yǎng)基上生長的菌落數量??梢允褂糜嫈灯骰蚴謩佑嫈捣椒ǎ涗浢總€稀釋度的菌落數。
6. 計算:根據記錄的菌落數,計算出原始樣品中的菌落總數。通常使用菌落計數公式進行計算,如平板計數法或稀釋倍數法。
7. 結果報告:將計算得到的菌落總數報告為每毫升或每克樣品中的菌落數量。
需要注意的是,在進行菌落總數測定時,要嚴格遵守無菌操作規(guī)程,以避免外部污染對結果的影響。此外,恒溫恒濕培養(yǎng)箱的條件應根據具體的實驗要求進行設置和控制,以確保培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性和準確性。
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