利用Solentim STUDIUS細胞成像分析儀評估細胞IgG產率的操作方法

  摘要：本實驗方法旨在介紹如何使用Solentim STUDIUS細胞成像分析儀進行細胞IgG 產率評估。本方法詳細描述了從鋪板到生長過程中的產率分析、排名和選擇的全過程，以及STUDIUS在細胞系開發(fā)中的應用價值。

關鍵詞：Solentim STUDIUS，細胞成像分析儀，細胞IgG產率，實驗方法

在生物制藥領域，細胞培養(yǎng)技術已成為生產重組蛋白類藥物的關鍵步驟。其中，細胞IgG產率的評估對于優(yōu)化生產過程和提高產量具有重要意義。Solentim STUDIUS細胞分析儀作為一種數(shù)字化時代的實驗室儀器，它具備樣本追蹤、自動分類、即時分類、避免人為錯誤和自動創(chuàng)建單克隆性報告等功能，為細胞IgG產率評估提供了高效、準確的解決方案。

使用Solentim STUDIUS細胞分析儀進行細胞IgG產率評估的詳細實驗方法步驟如下：

一、實驗準備

1. 實驗材料：細胞培養(yǎng)板、細胞懸液、IgG檢測試劑盒。

2. 實驗儀器：Solentim STUDIUS細胞分析儀、細胞培養(yǎng)箱、離心機、酶標儀。

3. 細胞培養(yǎng)板的準備：選擇適合細胞生長的細胞培養(yǎng)板，并根據(jù)實驗需求進行滅菌處理。

4. 細胞懸液的準備：從細胞庫中取出目標細胞株，進行復蘇和擴增，調整細胞密度至所需的接種密度。

3. IgG檢測試劑盒的準備：根據(jù)試劑盒說明書，準備所需的試劑和標準品。

4. Solentim STUDIUS細胞分析儀的準備：開啟儀器，進行系統(tǒng)自檢和校準。

二、細胞鋪板

1. 將準備好的細胞懸液按照預定的接種密度鋪板到細胞培養(yǎng)板中，每孔加入適量的細胞懸液。

2. 輕輕搖動培養(yǎng)板，使細胞均勻分布。為保證細胞鋪板均勻，可以使用Solentim VIPS進行全自動鋪板驗證。

3. 將細胞培養(yǎng)板放入細胞培養(yǎng)箱中，根據(jù)細胞生長需求設定適宜的培養(yǎng)條件（如溫度、濕度、CO2濃度等）。

三、細胞培養(yǎng)與成像分析

1. 在細胞培養(yǎng)過程中，根據(jù)實驗設計的時間點，使用Solentim STUDIUS細胞分析儀對細胞進行成像分析。

2. 在成像分析前，根據(jù)儀器操作手冊進行參數(shù)設置，包括成像區(qū)域、曝光時間、分辨率等。

3. 將細胞培養(yǎng)板放入STUDIUS儀器中，啟動成像分析程序。

4. 儀器將自動對每個孔進行成像，并記錄細胞的形態(tài)、生長狀態(tài)等數(shù)據(jù)。

5. 成像分析完成后，儀器將生成彩色節(jié)點，代表細胞生長過程中的關鍵時間點，實現(xiàn)數(shù)據(jù)跟蹤和審計追蹤。

四、IgG產量檢測

1. 根據(jù)IgG檢測試劑盒說明書，收集細胞培養(yǎng)上清液。

2. 將上清液進行適當稀釋，以便于酶標儀檢測。

3. 使用酶標儀，根據(jù)試劑盒提供的檢測方法，對上清液中的IgG含量進行定量檢測。

4. 記錄檢測結果，包括吸光度值、IgG濃度等。

五、數(shù)據(jù)處理與分析

1. 將STUDIUS成像分析結果與IgG產量檢測結果進行關聯(lián)，建立細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與IgG產率之間的關系。

2. 利用STUDIUS的數(shù)據(jù)分析功能，對細胞克隆進行排名和選擇，篩選出高IgG產率的細胞克隆。

3. 分析數(shù)據(jù)，生成報告，為后續(xù)實驗和生產過程提供參考。

六、實驗結束

1. 關閉Solentim STUDIUS細胞分析儀，進行日常維護和清潔。

2. 處理實驗產生的廢物，如廢棄的細胞培養(yǎng)板、試劑等。

3. 記錄實驗過程中的關鍵參數(shù)和結果，整理實驗數(shù)據(jù)。

通過以上詳細實驗方法步驟，使用Solentim STUDIUS細胞分析儀進行細胞IgG產率評估，可以實現(xiàn)從鋪板到生長過程中的產率分析、排名和選擇的全過程，提高實驗的準確性和效率。

七、實驗結果與分析

1. 產率分析結果：STUDIUS細胞分析儀可實時追蹤細胞生長過程，通過彩色節(jié)點記錄關鍵時間點的數(shù)據(jù)。通過對細胞形態(tài)、生長速度等參數(shù)的分析，可初步評估細胞IgG產率。

2. IgG產量檢測結果：酶標儀檢測結果顯示，不同細胞克隆的IgG產量存在較大的差異。將檢測結果與STUDIUS成像分析結果進行關聯(lián)，可進一步優(yōu)化細胞克隆的選擇。

3. 數(shù)據(jù)處理與分析結果：利用STUDIUS的數(shù)據(jù)分析功能，對細胞克隆進行排名和篩選。結合IgG產量檢測結果，篩選出高IgG產率的細胞克隆，為后續(xù)生產過程提供優(yōu)質種子。

八、討論與總結

本實驗方法使用Solentim STUDIUS細胞分析儀進行細胞IgG產率評估，實現(xiàn)了從鋪板到生長過程中的產率分析、排名和選擇的全過程。STUDIUS具備的數(shù)據(jù)跟蹤、審計追蹤和多級密碼保護用戶訪問等功能，為細胞系開發(fā)提供了可靠工具。實驗結果表明，STUDIUS在細胞IgG產率評估方面具有較高的準確性和效率。

在使用STUDIUS進行細胞IgG產率評估的過程中，應注意以下幾點：

1. 細胞鋪板密度：根據(jù)細胞類型和生長特性，選擇適當?shù)匿伆迕芏龋员ＷC細胞正常生長和產率評估的準確性。

2. 成像分析時間點：根據(jù)細胞生長速度和產率變化，合理設置成像分析時間點，以捕捉關鍵時期的細胞狀態(tài)。

3. 數(shù)據(jù)關聯(lián)與分析：將STUDIUS成像分析結果與IgG產量檢測結果進行關聯(lián)，綜合評估細胞IgG產率。利用STUDIUS的數(shù)據(jù)分析功能，優(yōu)化細胞克隆的選擇。

使用Solentim STUDIUS細胞成像分析儀進行細胞IgG產率評估的方法，為生物制藥領域提供了高效、準確的實驗手段。通過對細胞克隆的產率分析、排名和選擇，有助于提高重組蛋白類藥物的生產效率和質量。

蘇州阿爾法生物提供的STUDIUS通過整合來自VIPS PRO單細胞鋪板、Cell Metric®單克隆驗證和克隆生長監(jiān)測以及ICON™的IgG產率評估，幫助科學家能夠更快、更自信地做出決策。該軟件平臺根據(jù)用戶定義的參數(shù)自動、即時地分析數(shù)據(jù)，縮短了克隆的排名和選擇所需的時間。