【瑞士步琦】巴爺爺?shù)牟┛汀绾螌LC條件成功轉(zhuǎn)化到Flash色譜上

在進(jìn)行全面的 Flash 色譜之前，化學(xué)家通常會進(jìn)行薄層色譜(TLC)篩選。除了節(jié)省時(shí)間、溶劑和樣品外，用戶還可以使用他們的 TLC 數(shù)據(jù)為接下來的 Flash 色譜運(yùn)行找到更合適的參數(shù)。這篇文章強(qiáng)調(diào)了 TLC 結(jié)果如何轉(zhuǎn)化為優(yōu)化分離的理論，并展示了軟件如何將 TLC 數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為更好的純化條件。

假如平時(shí)愛好騎平衡車的你突然某一天想去嘗試自己從未涉獵的自行車時(shí)，并且很輕而易舉的就掌握了騎自行車的技巧，請你不要驚訝。這是因?yàn)槟阍O(shè)法將平衡技能從簡單的無踏板自行車轉(zhuǎn)移到復(fù)雜的自行車上。

有趣的是，我們實(shí)驗(yàn)室里的科學(xué)家也有類似的功能。我們通常從更簡單的實(shí)驗(yàn)和方法開始，這些實(shí)驗(yàn)和方法需要更少的資源，然后再轉(zhuǎn)移我們的知識并嘗試更復(fù)雜的技術(shù)。以薄層色譜（TLC）和 Flash 色譜為例。由于簡單、快速和樣品使用量少，許多 Flash 用戶更喜歡在純化前對樣品進(jìn)行 TLC 篩選。就像從平衡車到腳踏自行車一樣，人們可以使用從 TLC 實(shí)驗(yàn)中獲得的信息進(jìn)行更具挑戰(zhàn)性的Flash色譜分析。

如何在自動化 Flash 色譜儀將 TLC 上的結(jié)果轉(zhuǎn)化成為有用的方法？

首先我們需要理解從 TLC 色譜上獲得的數(shù)據(jù)與待分離 Flash 色譜柱體積（CV）之間的關(guān)系。一個(gè)典型的 TLC 色譜分析如下：

▲ TLC 色譜示例，其中(a)表示溶劑前沿移動的距離，(b)表示分析物移動的距離

保留因子（Rf）=分析物到原點(diǎn)的距離（b）/溶劑前沿到原點(diǎn)的距離（a）

其中：

R_f =1 表示在 TLC 上沒有保留(隨著溶劑前移)，

R_f =0 表示對溶劑沒有親和力(停留在起跑線上)。

最佳 R_f 值范圍為 0.15 ~ 0.35,CV 值范圍為 2.8 ~ 6.7。

▲ 不同 R_f 和 CV 值下的 TLC 色譜和 Flash 色譜儀示例。(a)較小的 CV 值導(dǎo)致較短的運(yùn)行時(shí)間，這可能導(dǎo)致分離度不夠。(b) CV 范圍在 2.8 和 6.7 之間的結(jié)果是分辨率和運(yùn)行時(shí)間以及溶劑消耗之間的最佳平衡。(c)較大的 CV 值導(dǎo)致運(yùn)行時(shí)間長，溶劑消耗高。