離子色譜法對白酒中有機(jī)酸含量的測定

對白酒中有機(jī)酸的測定

關(guān)鍵詞：離子色譜柱；陰離子；有機(jī)酸；白酒。

引言

濃香型白酒中的酸類物質(zhì)是形成酯 （香） 的主要前驅(qū)物質(zhì)，也是感官反應(yīng)中的主要的呈味呈香物質(zhì)，白酒生產(chǎn)中產(chǎn)生的酸是形成酒中芳香組分的基礎(chǔ)物質(zhì)。不同的酸與醇在酶的作用下，生成不同的酯，同時酸本身在酒中還起重要的調(diào)味作用。從單一的香味成分的感官反映結(jié)果看，每種有機(jī)酸都有不同的氣味，因其刺激閾值的理解度的差異，所以有引起香氣和口味變化與差異。酸可以調(diào)節(jié)口味使酒體醇和爽口，更主要的是酸類物質(zhì)是形成相對應(yīng)的乙酯類的香味物質(zhì)的前驅(qū)物質(zhì)，沒有酸就沒有相對應(yīng)的乙酯類。目前能定量測定的白酒中的主要酸有乙酸，己酸和丁酸，而含量較多的乳酸不易測出，并且時間也較長。離子交換色譜法在分析離子型有機(jī)化合物方面有其優(yōu)勢。

本文運(yùn)用離子交換分析方式加上抑制型電導(dǎo)檢測，做出白酒的“指紋”特征圖譜。采用高效離子色譜法分析白酒中的有機(jī)酸，具有靈敏度高、分析速度快的特點。采用離子色譜法對白酒中有機(jī)酸進(jìn)行含量測定。筆者采用皖儀離子色譜儀配置電導(dǎo)檢測器，KOH為淋洗液。該方法前處理簡單，方法線性良好，重復(fù)性穩(wěn)定，適用于白酒中有機(jī)酸的檢測。

1、實驗部分

1.1  主要儀器與試劑

離子色譜儀：IC6600系列，配備電導(dǎo)檢測器、陰離子抑制器、自動進(jìn)樣器AS3110系列，皖儀科技。

IC6600系列多功能離子色譜儀

皖儀諾譜陰離子分析柱：HS-5A-P2,4.6×250 mm,5μm；

皖儀諾譜陰離子保護(hù)柱：HS-5AG，4×30 mm；

奎尼酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）；

乳酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）；

異戊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）；

戊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）；

甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）；

己酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）；

一次性注射器（2mL）；

水系微孔濾膜（0.45μm）；

前處理小柱：RP柱；

一次性注射器（2mL）；

水系針式過濾器（0.22μm）；

萬分之一電子天平；

實驗用水為皖儀科技超純水凈化器制備，電導(dǎo)率為18.25MΩ·cm（25℃）；

白酒（某品牌市售）。

1.2 溶液配制

1.2.1 混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液

移取10 mL奎尼酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）、10mL戊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）、10mL甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）、10mL異戊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）于同一100mL容量瓶中，用水稀釋定容至標(biāo)線，混勻；配制成含有100 mg/L 的奎尼酸、100 mg/L戊酸、100 mg/L甲酸及100 mg/L異戊酸的混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。

1.2.2 系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

分別準(zhǔn)確移取乳酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）0.1mL、0.2mL、0.5mL、1mL、2 mL、5mL、10mL，奎尼酸、戊酸、甲酸及異戊酸混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（100mg/L）0.1mL、0.2mL、0.5mL、1mL、2 mL、5mL、10mL，己酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L）0.02mL、0.1mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2mL、3mL，置于一組 100 mL 容量瓶中，用水稀釋定容至標(biāo)線，混勻。配制成7個不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)系列，標(biāo)準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度見表 1。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線系列濃度梯度

1.2  儀器工作條件

色譜柱溫度：30 ℃；

電導(dǎo)池溫度：35 ℃；

淋洗液：KOH梯度淋洗，見下表2 ；

流速：1.0 mL/min ；

抑制器電流：66mA ；

進(jìn)樣體積：20μL。

表2 KOH梯度淋洗條件

1.4 樣品前處理

采用一次性注射器吸取樣品后過前處理小柱RP柱及0.45μm水系濾膜后備用，過RP柱去除樣品中的有機(jī)物，過0.45μm水系濾膜去除樣品中的顆粒物。

2    結(jié)果與討論

2.1 檢出限驗證

在1.3儀器工作條件對混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，得到6種有機(jī)酸標(biāo)準(zhǔn)色譜圖如圖1，測試數(shù)據(jù)見下表3。由圖1及表3可知，6種有機(jī)酸的檢出限優(yōu)異。

圖1  6種有機(jī)酸檢出限測試譜圖

表3  6種有機(jī)酸檢出限測試數(shù)據(jù)

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性驗證

將1.2.2中配制的標(biāo)準(zhǔn)曲線系列工作溶液注入色譜系統(tǒng)中，按照1.3工作條件進(jìn)行分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線測試譜圖見下圖2，線性見下表4，線性相關(guān)系數(shù)R均大于0.999，線性良好。

圖2 標(biāo)準(zhǔn)曲線測試譜圖

表4  標(biāo)準(zhǔn)曲線線性

2.3 樣品檢測

按照1.4樣品前處理方法對白酒樣品進(jìn)行檢測，測試譜圖見下圖3，數(shù)據(jù)見下表5。

圖3 白酒稀釋50倍重復(fù)6針測試譜圖

表5 測試數(shù)據(jù)

重復(fù)條件下獲得兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值占其算數(shù)平均值的結(jié)果:

3、總結(jié)

本次采用皖儀科技離子色譜儀IC6600配置電導(dǎo)檢測器，建立離子色譜法對白酒中己酸等有機(jī)酸測定進(jìn)行檢出限、標(biāo)準(zhǔn)曲線及重復(fù)性驗證，測試結(jié)果峰型對稱，線性優(yōu)異，分離度、重復(fù)性滿足要求，靈敏度高，重復(fù)條件下獲得兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值占其算數(shù)平均值的結(jié)果小于10%，滿足標(biāo)準(zhǔn)GB10345-2022白酒的測試要求。