艱難梭菌（Clostridium difficile，CD）是一種產(chǎn)毒素的專性厭氧革蘭陽性芽孢菌，廣泛分布于人和動物的腸道及環(huán)境中。因其對氧極為敏感，在傳統(tǒng)培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)較困難，故命名為艱難梭菌。

在過去的十年里，艱難梭菌感染的頻率和嚴(yán)重程度在世界范圍內(nèi)不斷增加，成為引起抗生素相關(guān)性腹瀉和院內(nèi)感染的主要病原菌之一。2013年和2019年美國CDC《抗生素耐藥威脅報告》將艱難擬梭菌列為緊急威脅的耐藥菌。

艱難梭菌感染的危險因素：

·抗生素使用(2-3月使用以上)

·住院(2-3個月長期住院)

·高齡(＞65歲)

·鼻飼管和胃腸道治療

·胃酸抑制藥物-質(zhì)子泵抑制劑和組胺2(H2)受體拮抗劑

·免疫抑制狀態(tài)

·炎癥性腸病

·胃腸道手術(shù)

近年來，我國部分地區(qū)已檢測出高毒力株，表明艱難梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)已對我國臨床構(gòu)成了威脅。同時，研究表明我國的CDI分子流行病學(xué)特征具有自身特點(diǎn)，使得CDI的防控形勢十分嚴(yán)峻。因此，臨床快速、準(zhǔn)確診斷CDI，對改善患者預(yù)后及節(jié)省我國醫(yī)療支出具有重要意義。

2017年我國發(fā)布了《中國成人艱難梭菌感染診斷和治療專家共識》，將艱難梭菌感染診斷標(biāo)準(zhǔn)更新為：患者出現(xiàn)中至重度腹瀉或腸梗阻，并滿足以下任一條件：（1）糞便檢測CD毒素或產(chǎn)毒型CD結(jié)果陽性；（2）內(nèi)鏡下或組織病理檢查顯示偽膜性腸炎。

目前，艱難梭菌的檢測方法可分為實驗室檢測和臨床診斷策略。實驗室檢測主要為菌株檢測、毒素的核酸檢測和毒性檢測。

菌株檢測中，厭氧培養(yǎng)法費(fèi)用較低、操作簡單，但仍需生物化學(xué)反應(yīng)鑒定且無法判定是否為產(chǎn)毒株，因此后續(xù)可通過PCR法或MALDI-TOF MS兩種技術(shù)對典型的艱難梭菌菌落進(jìn)行鑒定。

2019年發(fā)布的《MALDI - TOF MS在臨床微生物鑒定中的標(biāo)準(zhǔn)化操作專家共識》為臨床微生物的高效鑒定提供了規(guī)范性指導(dǎo)。目前，國內(nèi)已有實驗室使用MALDI-TOF MS技術(shù)對經(jīng)培養(yǎng)法獲得的艱難梭菌疑似菌株進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定，提升了臨床實驗室鑒定艱難梭菌的水平及效率。

雖然目前艱難梭菌的檢測方法有多種，但糞便培養(yǎng)仍然是艱難梭菌檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。在得到純培養(yǎng)的菌株后，后續(xù)還對培養(yǎng)后的菌株進(jìn)行毒素分型、分子分型，并檢測其耐藥性，方便臨床根據(jù)耐藥性結(jié)果給患者對癥下藥，減少抗生素濫用風(fēng)險。除此之外，還能夠研究其傳播能力（如芽孢形成、黏附能力等）與傳播進(jìn)化機(jī)制，預(yù)防疾病的傳播。

《艱難梭菌感染診斷（T/CPMA 008-2020）》

在艱難梭菌糞便培養(yǎng)培養(yǎng)時，需要先使用無水乙醇對糞便進(jìn)行前處理，然后使用特殊的培養(yǎng)基CCFA或CDMN，嚴(yán)格厭氧培養(yǎng)48-72h。

傳統(tǒng)培養(yǎng)方法：采用厭氧產(chǎn)氣袋培養(yǎng)。但由于產(chǎn)氣袋生成厭氧環(huán)境時間較長（40分鐘以上），細(xì)菌暴露在有氧環(huán)境中的時間較長，導(dǎo)致艱難梭菌檢出率偏低。

最新培養(yǎng)方案：如今用戶可選擇采用智能厭氧微生物培養(yǎng)系統(tǒng)，實現(xiàn)更加嚴(yán)格的厭氧培養(yǎng)環(huán)境。例如，浙江省疾病預(yù)防控制中心，配合采用了DW-100A-K智能厭氧微生物培養(yǎng)系統(tǒng)，厭氧環(huán)境的生成時間大幅縮短，避免樣本長時間暴露在有氧環(huán)境中，且生成氣體環(huán)境嚴(yán)格，大大提高了艱難梭菌檢出率。

DW-100A-K系列 智能厭氧微生物培養(yǎng)系統(tǒng)

儀器服務(wù)于各類厭氧菌微需氧菌和嗜二氧化碳菌的培養(yǎng)、檢驗，可根據(jù)需要選擇特定氧氣濃度（0%-15%可選）和CO₂濃度（5%-15%可選）。儀器能快速生成環(huán)境，微需氧最快約2 min，厭氧最快約4 min，儀器穩(wěn)定可靠，確保重現(xiàn)性100%。

設(shè)備自帶五級自檢質(zhì)控（氣體輸入氣壓檢測、罐體連接性檢測、罐體泄漏性檢測、罐體密封性檢測、催化劑活性檢測），確保培養(yǎng)罐氣密性，嚴(yán)格保障厭氧環(huán)境。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

1、一機(jī)多用：厭氧、微需氧和嗜CO₂培養(yǎng)；

2、快速生成環(huán)境：微需氧、CO₂最快2 min，厭氧最快4 min；

3、脫機(jī)培養(yǎng)：培養(yǎng)罐可從儀器上卸載、獨(dú)立控制，設(shè)置不同培養(yǎng)環(huán)境，培養(yǎng)過程密封，避免樣本泄漏；

4、罐體靈活配置：多種罐體可選，滿足不同培養(yǎng)需求；

5、QA質(zhì)控軟件：培養(yǎng)前5級質(zhì)控檢測，確保重現(xiàn)性100%。