如何設(shè)置和進(jìn)行抗酸染色？

抗酸細(xì)菌(AFB)，即分枝菌酸(細(xì)胞包膜中的脂質(zhì))含量高的細(xì)菌，使用抗酸染色進(jìn)行檢測(cè)。這些染色區(qū)分了AFB，AFB導(dǎo)致諸如肺結(jié)核和其他呼吸系統(tǒng)疾病的疾病。AFB通常在特殊的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中進(jìn)行測(cè)試，因?yàn)檫@些疾病具有高度傳染性。無(wú)論你測(cè)試的是手術(shù)標(biāo)本、呼吸道標(biāo)本還是痰液標(biāo)本，這些方案中的兩種復(fù)染劑要么是亮綠，要么是亞甲藍(lán)；為不耐酸的生物體提供不同的外觀。您的病理學(xué)家的偏好將決定您應(yīng)該使用哪種抗酸染色顏色。

此外，這種染色有兩種變化——冷染色法(Kinyoun)或熱法(澤赫爾·尼爾森)。最初的澤赫爾·尼爾森方法更傳統(tǒng)，而金永法由于不需要加熱而越來(lái)越受歡迎。

抗酸染色

抗酸染色用于鑒定抗酸微生物。這些細(xì)菌將被方案染成紅色。

抗酸染色(金永或澤赫爾·尼爾森)協(xié)議

1. Fix the slide.

2. Kinyoun (cold method)

   :淹沒(méi)載玻片或浸沒(méi)在Kinyoun石炭酸品紅溶液中:5分鐘

   澤赫爾·尼爾森(熱法)

   :淹沒(méi)載玻片或浸沒(méi)在澤赫爾尼森石炭酸品紅溶液中，加熱:3分鐘

可以使用載玻片架或染色單個(gè)載玻片。

3. 用去離子水輕輕沖洗。
4. 使用脫色劑溶液去除大部分污漬，直到洗滌液變得清澈。
5. 用去離子水輕輕沖洗。
6. 將載玻片浸入亞甲藍(lán)溶液或亮綠溶液中30秒至1分鐘。
7. 用去離子水輕輕沖洗，然后風(fēng)干。
8. 相應(yīng)地檢查幻燈片。

抗酸微生物被染成紅色，而非抗酸微生物和背景被染成綠色或藍(lán)色。分枝桿菌的一個(gè)主要特征是它們是“抗酸的”,一旦用苯胺染料，堿性品紅染色，它們很難脫色，因此即使暴露于酸性酒精漂洗中也能保持紅色。

石炭酸品紅被用作抗酸生物的主要染料，因?yàn)樗诩?xì)胞壁脂質(zhì)中比在酸性醇中更易溶解，所以生物將保留染料的紅色。如果你發(fā)現(xiàn)抗酸細(xì)菌沒(méi)有像預(yù)期的那樣保持顏色，請(qǐng)閱讀我們關(guān)于如何修復(fù)不保持染料的抗酸細(xì)菌的帖子。

Kinyoun方法也可以修改為弱酸快速染色，它使用5%的硫酸而不是鹽酸。除了對(duì)分枝桿菌染色外，弱酸性抗酸染色將對(duì)脫色后不能保持石炭酸品紅的生物體進(jìn)行染色。

抗酸染色——Ziehl Neelsen