酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀,酶標(biāo)儀檢測技術(shù)是一種高通量微孔板檢測技術(shù),操作簡便,被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、生物制藥、體外診斷、食品安全、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域。傳統(tǒng)酶標(biāo)儀是指具備吸收光檢測功能的酶聯(lián)免疫檢測儀,隨著科學(xué)技術(shù)發(fā)展和市場需求不斷豐富,如今酶標(biāo)儀所具備的檢測功能日益豐富,在光吸收檢測(Abs)基礎(chǔ)上增加了熒光強(qiáng)度(FI)、發(fā)光檢測(Lum)、熒光偏振(FP)、時(shí)間分辨熒光(TRF)、勻相時(shí)間分辨熒光(HTRF)等多種檢測技術(shù)。然而每一種技術(shù)都具有的應(yīng)用價(jià)值和局限性,下面將對(duì)幾個(gè)主流技術(shù)進(jìn)行詳細(xì)介紹。
工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同,在特定波長下檢測被測物的吸光值,稱為光吸收檢測(Absorbance,Abs)。只做吸收光檢測的酶標(biāo)分析儀實(shí)際上就是一臺(tái)變相光電比色計(jì)或分光光度計(jì),其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。光源發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔板中的待測標(biāo)本。
熒光(Fluorescence)是一些原子和分子吸收特定波長的光(激發(fā):Ex),隨后短暫發(fā)射 (Em) 更長波長的光的特性。激發(fā)峰和發(fā)射峰之間的距離稱為斯托克斯 (Stokes) 位移,該位移取決于熒光基團(tuán)。熒光利用一個(gè)外部光源,在特定波長下激發(fā)樣品,熒光基團(tuán)受到適當(dāng)波長的激發(fā),分子從基態(tài)轉(zhuǎn)化成激發(fā)態(tài)。隨著分子回到基態(tài),能量會(huì)以熱(損失能量)和能量更低、波長更長的光的形式釋放。
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