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質(zhì)粒大量提取試劑盒采用堿裂解法裂解細(xì)胞,通過(guò)吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結(jié)合溶液中的 DNA的特性提取質(zhì)粒DNA。吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料能高效、專一地吸附 DNA,可最大限度去除雜質(zhì)蛋白質(zhì)及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。從 50-100m1大腸桿菌 LB培養(yǎng)液中，可快速提取 200-300 μg純凈地高拷貝質(zhì)粒 DNA，提取率達(dá) 85-90%。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒 DNA可適用于各種常規(guī)的分子生物學(xué)試驗(yàn)，包括酶切、PCR、測(cè)序、連接和轉(zhuǎn)化等試驗(yàn)。本試劑盒無(wú)需使用酚等有毒試劑，操作安全。
質(zhì)粒大量提取試劑盒的使用注意：
1.在使用前，請(qǐng)檢查溶液是否出現(xiàn)混濁或沉淀現(xiàn)象。如有混濁或沉淀，可在適當(dāng)溫度下加熱幾分鐘，待溶液恢復(fù)澄清后再使用。
2.溶液在使用后應(yīng)立即擰緊蓋子，以防止被空氣中二氧化碳酸化。
3.洗脫緩沖液體積不應(yīng)過(guò)小，否則會(huì)影響回收效率。同時(shí)，洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影響，應(yīng)保證其在適當(dāng)?shù)姆秶鷥?nèi)。
4.對(duì)于低拷貝質(zhì)粒或大于一定大小的大質(zhì)粒，應(yīng)加大菌體使用量，并按照比例增加各溶液的用量。同時(shí)，在吸附和洗脫時(shí)可以適當(dāng)?shù)匮娱L(zhǎng)時(shí)間，以增加提取效率。
5.提取過(guò)程中應(yīng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作，以確保安全和健康。
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