HPLC法分析帶保護基團的亞磷酰胺單體

摘要：本文建立了亞磷酰胺單體N-苯甲?；?5'-O-(4,4-二甲氧基三苯甲基)-2'-O-甲基腺苷-3'-(2-氰基乙基-N,N-二異丙基)的HPLC測定方法。采用色譜柱Shim-pack Scepter HD-C18、ShimNex UP C18分析此亞磷酰胺單體，結(jié)果顯示，此亞磷酰胺單體的兩個手性同分異構(gòu)體色譜峰峰型良好，分離度大于1.5，滿足分析要求。此方法可為帶保護基團的亞磷酰胺單體的檢測提供參考。
關(guān)鍵詞：帶保護基團的亞磷酰胺單體 Shim-pack Scepter HD-C18 ShimNex UP C18 HPLC
 

1. 實驗部分
1.1 實驗儀器及耗材

Shimadzu LC-40D 高效液相色譜儀；
色譜柱：Shim-pack Scepter HD-C18（5 μm，4.6×250mm；P/N：227-31024-06）；
色譜柱：ShimNex UP C18（5 μm，4.6×250mm；P/N：380-01231-49）；
純水機：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；
SHIMSENDisc HPTFE針式過濾器（P/N：380-00341）；
LC-MS認證樣品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液槍：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析條件

柱溫：20℃
檢測波長：235nm
流速：1.0 mL/min
進樣量：5 µL
流動相：A：20mM甲酸銨，B：乙腈：甲醇=1：2；A：B=15：85

2. 實驗結(jié)果

2.1 色譜柱：Shim-pack Scepter HD-C18（5 μm，4.6×250mm；P/N：227-31024-06）

按照上述色譜條件（1.2）進行采集，對照品溶液如下：
對照品溶液

2.2 色譜柱：ShimNex UP C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01231-49）；

按照上述色譜條件（1.2）進行采集，對照品溶液如下：
對照品溶液

3. 結(jié)論

本文建立了帶保護基團的亞磷酰胺單體N-苯甲?；?5'-O-(4,4-二甲氧基三苯甲基)-2'-O-甲基腺苷-3'-(2-氰基乙基-N,N-二異丙基)的HPLC測定方法。采用色譜柱Shim-pack Scepter HD-C18、ShimNex UP C18分析此亞磷酰胺單體，結(jié)果顯示，此亞磷酰胺單體的兩個手性同分異構(gòu)體峰，峰型良好，分離度大于1.5，滿足分析要求。此方法可為帶保護基團的亞磷酰胺單體的檢測提供參考。