白蛋白檢測(cè)試劑盒(溴甲酚紫微板法)
產(chǎn)品貨號(hào): BA1555
產(chǎn)品規(guī)格: 100T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
總蛋白(Total?Protein,TP)由白蛋白和球蛋白組成,檢測(cè)白蛋白的方法有雙縮脲法、色氨酸法、染料結(jié)合法。檢測(cè)白蛋白的染料結(jié)合法可采用溴甲酚綠或溴甲酚紫染料結(jié)合,上述染料對(duì)白蛋白具有高度的親和力,通常監(jiān)測(cè)染料與白蛋白結(jié)合的初速率,該速率與樣品中白蛋白濃度成正比。白蛋白檢測(cè)試劑盒(溴甲酚紫微板法)檢測(cè)原理是在酸性環(huán)境下,白蛋白分子帶正電荷,與帶負(fù)電荷的溴甲酚紫(Bromocresol?purple,BCP)結(jié)合生成綠色復(fù)合物,在603nm處有吸收波,該復(fù)合物的吸光度與白蛋白濃度成正比,與同樣處理的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)比較,求得待測(cè)樣品中白蛋白濃度。本試劑盒多用于人或動(dòng)物血清、血漿、組織等樣本中的蛋白含量測(cè)定,該法操作簡(jiǎn)單、方法特異,既可手工操作,又可采用自動(dòng)分析儀檢測(cè)。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱 | 100T | 保存條件 |
試劑(A): BCP試劑 | 25ml | 4℃,避光 |
試劑(B): 白蛋白標(biāo)準(zhǔn) | 20mg | 室溫 |
試劑(C):白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液 | 10ml | 室溫 |
自備材料:
1. 離心管、小試管
2. 96孔板
3. 酶標(biāo)儀
操作步驟(僅供參考):
1. 取白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液或稀釋液加入到白蛋白標(biāo)準(zhǔn)中,充分溶解后配制成40mg/ml的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液,配制后可立即使用,溶解后的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)-20℃保存。亦可按自己試驗(yàn)要求繼續(xù)進(jìn)行稀釋,如稀釋至1mg/ml。特別提示:待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,白蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測(cè)蛋白溶解于蔗糖中,亦取白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作為溶解白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液。
2. 樣本處理:血清、血漿樣本直接取檢測(cè)。對(duì)于組織樣本,組織質(zhì)量(g):生理鹽水比例,加入生理鹽水或PBS,冰浴下勻漿后,離心,取上清待檢。
3. 白蛋白加樣操作,按下表依次加入試劑:
加入物(μL) | 空白孔 | 標(biāo)準(zhǔn)孔 | 待測(cè)孔 |
白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液 | 5 | - | - |
白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液(40mg/ml) | - | 5 | - |
待檢樣品(血清、血漿、組織勻漿液) | - | - | 5 |
BCP試劑 | 250 | 250 | 250 |
4. 先在酶標(biāo)儀處以空白管調(diào)零,逐管加入BCP試劑,并立即混勻。
5. 放置(30±3)s,讀取標(biāo)準(zhǔn)孔和各待測(cè)孔的吸光度。
6. 當(dāng)遇到脂血混濁,可設(shè)“樣本空白孔”:取待測(cè)樣品加入白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液,予以校正。
計(jì)算:
白蛋白(g/L)=(待測(cè)孔吸光度/標(biāo)準(zhǔn)孔吸光度)×白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液濃度(g/L)
參考區(qū)間:
健康成年人 | 36~46g/L |
注意事項(xiàng):
1. 白蛋白標(biāo)準(zhǔn)粉末溶解于白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液后,即獲得白蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液,該原液中含有防腐劑,不影響后續(xù)檢測(cè),該蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液-20℃長(zhǎng)期保存。
2. 如果沒有分光光度計(jì),也可以使用酶標(biāo)儀測(cè)定。使用酶標(biāo)儀測(cè)定蛋白濃度時(shí),每個(gè)試劑盒可以測(cè)定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著增加。
3. 本法線性范圍是10~50g/L,在10~40g/L呈良好線性范圍。
4. CV可達(dá)0.45%,回收率可達(dá)99.3%~102%,平均回收率達(dá)100.5%。
5. 該法測(cè)定正常樣本的批間變異系數(shù)為6.3%。
有效期:6個(gè)月有效。白蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制成溶液后應(yīng)-20℃凍存。
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