Qubit檢測(cè)中遇到的問(wèn)題查缺補(bǔ)漏

您在Qubit檢測(cè)中遇到了除“標(biāo)準(zhǔn)品錯(cuò)誤”以外的其它試劑盒相關(guān)問(wèn)題。

這里有一些建議，不知對(duì)您是否有幫助，一起看看吧
1.在“查看標(biāo)準(zhǔn)品”或"查看校準(zhǔn)"下查看標(biāo)準(zhǔn)品的原始熒光值（RFU）。確認(rèn)樣本的熒光值落在標(biāo)準(zhǔn)品的熒光值之間（或稍稍高于最高的標(biāo)準(zhǔn)品）。如果不是，那么樣本已經(jīng)超過(guò)了檢測(cè)的精確范圍。請(qǐng)參看產(chǎn)品目錄中的各個(gè)檢測(cè)試劑盒的置信區(qū)間。如果檢測(cè)樣本超過(guò)了置信區(qū)間，那么檢測(cè)讀數(shù)將是2位有效數(shù)字而不是3位。 要使樣本進(jìn)入準(zhǔn)確測(cè)定范圍，可稀釋樣本或使用更多或更少體積的樣本（例如，如果樣本讀值較低的話，使用10 µL而非2 µL）。
2.檢查溫度因素。檢測(cè)是溫度敏感性的，熒光信號(hào)在較高溫度時(shí)會(huì)減弱。樣本之間或樣本和標(biāo)準(zhǔn)品之間的溫度波動(dòng)可能引發(fā)問(wèn)題。
確保緩沖液和保存在DMSO內(nèi)的Qubit試劑處于室溫。緩沖液和Qubit試劑應(yīng)保存于室溫，而不是冰箱內(nèi)。保存于 4°C的緩沖液即使在室溫放置2–3小時(shí)仍然不能達(dá)到室溫。
確保你的樣本和工作溶液不能過(guò)熱（包括剛從離心機(jī)取出時(shí)）。保留在Qubit儀器內(nèi)過(guò)久或多次讀取的樣本可能會(huì)升溫。如果你想對(duì)一個(gè)試管多次讀數(shù)，你應(yīng)該將它從儀器內(nèi)取出，放置30秒以平衡至室溫，然后進(jìn)行下一次讀數(shù)。另外，在讀數(shù)之前，不要將試管握在手中過(guò)長(zhǎng)時(shí)間，因?yàn)檫@會(huì)加熱樣本，使讀數(shù)變低。
3.確保正確制備Qubit工作溶液（使用試劑盒內(nèi)的緩沖液1:200稀釋）。確保正確制備標(biāo)準(zhǔn)品（10 µL標(biāo)準(zhǔn)品加入到190 µL工作溶液中）。確保試管中加入至少200µL液體（對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)品和樣本均是如此）。
4.確保你使用的試劑和標(biāo)準(zhǔn)品是6個(gè)月之內(nèi)的，并且標(biāo)準(zhǔn)品保存方法正確。Qubit試劑存儲(chǔ)溶液應(yīng)盡可能避光保存。
5.確保在Qubit熒光計(jì)上選擇的程序跟你所用的Qubit檢測(cè)試劑盒是匹配的。
6.讀取標(biāo)準(zhǔn)品和樣本數(shù)值時(shí)，確保儀器的蓋子關(guān)閉。
7.使用推薦的檢測(cè)管（檢測(cè)管不能阻擋儀器蓋上蓋子，并且檢測(cè)管應(yīng)當(dāng)光學(xué)透明）。某些類型的檢測(cè)管可能有較高的自發(fā)熒光而影響檢測(cè)。
8.你在Qubit儀器中輸入你所加入到工作溶液中的存儲(chǔ)液的微升數(shù)了嗎？如果輸入了，那么Qubit熒光計(jì)獲得此信息后給出的濃度是你的存儲(chǔ)液的濃度。如果沒(méi)有輸入，那么你得到的濃度是檢測(cè)試管（你放入Qubit熒光計(jì)的試管）內(nèi)的濃度——不是你的存儲(chǔ)液濃度。
9.如果你是將Qubit檢測(cè)的結(jié)果和使用UV吸光值獲得的濃度進(jìn)行比較，并且基于UV吸光值的濃度顯著較高，那么可能是因?yàn)楹怂峄虻鞍孜廴?。Qubit檢測(cè)試劑對(duì)于DNA, RNA和蛋白的檢測(cè)特異性比吸光值測(cè)定法高得多。