液相色譜系統(tǒng)中氣泡的產(chǎn)生可能會影響實驗結果,導致雜峰的產(chǎn)生,基線漂移、峰形異常等現(xiàn)象。
氣泡產(chǎn)生的原因有以下幾點:
① 流動相溶液中溶解有氧氣或混入了空氣:流動相中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡。
② 系統(tǒng)開始工作時未能將流路中的空氣驅(qū)趕干凈:在液相色譜系統(tǒng)開始工作前,未能將流路中的空氣驅(qū)趕干凈,容易產(chǎn)生氣泡。
③ 在注入樣品時不注意混入了空氣:在樣品注入過程中,如果不注意,也容易將空氣混入系統(tǒng)中。
排除氣泡的方法包括但不限于:
對流動相進行脫氣處理:可以使用在線脫氣、吹氦脫氣法等方法來去除流動相中的溶解氣體。
在系統(tǒng)開始工作前進行排氣:在啟動泵之前,確保泵的吸液管中無氣泡,可以通過打開旁通閥,用注射器慢慢吸液,觀察進液管無氣泡后再吸10ml將流路中的空氣驅(qū)趕干凈。
清洗系統(tǒng):如果系統(tǒng)中存在氣泡,可以嘗試用甲醇或異丙醇等有機溶劑清洗系統(tǒng),超聲清洗單向閥、密封圈和泵頭整體。
進樣前排氣:在進樣前,注意排出進樣針里的空氣,將進樣針頭垂直向上,用手指墊上濾紙摁住針頭處,往上推,氣泡就很容易上去并被排出。
色譜柱沖洗:如果色譜柱中進入氣泡,可以嘗試用純甲醇小流速長時間沖洗反相色譜柱,隨后逐步加大流速直至色譜柱壓力平穩(wěn)。
注意操作細節(jié):在液相色譜操作過程中,要注意避免產(chǎn)生氣泡,例如在更換流動相或色譜柱時,要確保接口處緊密連接,避免空氣進入。
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