CYTOOCHIPS™ HL-FN650 X18

CYTOOchip 是一個 19.5x19.5 mm 的蓋玻片，其微圖案通過光刻技術(shù)轉(zhuǎn)移到高質(zhì)量、低熒光硼硅酸鹽玻璃上。 CYTOOchips 與所有倒置顯微鏡兼容。網(wǎng)格坐標印在芯片的底面，使用戶能夠隨著時間的推移返回到wan全相同的單元/微圖案。這些芯片與 CYTOOchambers 結(jié)合使用時是高分辨率活細胞成像的理想選擇。

產(chǎn)品規(guī)格

參考：

10-009-13-18

圖案：

H

尺寸：

大 (1600 µm2)

涂層：

FN650

數(shù)量

18 件套

刊物

斷開高爾基帶與中心體的連接可防止定向細胞遷移和纖毛發(fā)生

烏爾塔多 L / 卡巴列羅 C / 加維蘭 MP / 卡德納斯 J / 博南斯 M / 里奧斯 RM

關(guān)鍵詞：

中心體周圍高爾基體帶狀組織、akap450 n 端片段、微管成核、中心體活性、高爾基體定位、定向細胞遷移、纖毛發(fā)生、y 形微圖案蓋玻片、細胞運動

抽象的

細胞組織成上皮取決于細胞與細胞外基質(zhì) (ECM) 和鄰近細胞的相互作用。細胞間粘附在上皮拓撲調(diào)節(jié)中的作用已得到充分描述。zhong所周知，ECM 可促進細胞遷移并為細胞錨定提供結(jié)構(gòu)支架，但其對多細胞形態(tài)發(fā)生的貢獻卻鮮為人知。我們開發(fā)了一個最小的模型系統(tǒng)來研究 ECM 如何影響細胞間連接的空間組織。纖連蛋白微圖案用于限制細胞-ECM 粘附的位置。我們發(fā)現(xiàn) ECM 影響細胞間連接定位的穩(wěn)定性以及細胞內(nèi)和細胞間力的大小。細胞間連接yong久移位，只要它們靠近 ECM，就會受到很大的垂直拉力。它們僅在缺乏 ECM 的地區(qū)保持穩(wěn)定，在那里它們受到較低的張力。 ECM 空間組織的異質(zhì)性引起細胞內(nèi)機械約束的各向異性分布，這似乎會調(diào)整它們的位置以最小化細胞內(nèi)和細胞間的力。這些結(jié)果揭示了 ECM 在細胞機械調(diào)節(jié)和細胞間連接定位中的形態(tài)發(fā)生作用。這似乎調(diào)整了它們的位置以最小化細胞內(nèi)和細胞間的力。這些結(jié)果揭示了 ECM 在細胞機械調(diào)節(jié)和細胞間連接定位中的形態(tài)發(fā)生作用。這似乎調(diào)整了它們的位置以最小化細胞內(nèi)和細胞間的力。這些結(jié)果揭示了 ECM 在細胞機械調(diào)節(jié)和細胞間連接定位中的形態(tài)發(fā)生作用。

上皮片位于細胞外基質(zhì) (ECM) 層上，即所謂的基底膜。在此類上皮細胞中，細胞在與 ECM 接觸的細胞基底部分上建立基于整合素的粘附，并在遠離與 ECM 接觸的接觸側(cè)域的頂端部分上建立基于鈣粘蛋白的細胞間粘附。兩個粘附系統(tǒng)顯示出不重疊的空間分布。細胞-細胞和細胞-ECM 粘附都是建立適當?shù)纳掀ば螒B(tài)所必需的 ( 1 )。它們都參與將外部物理信號機械轉(zhuǎn)導為細胞內(nèi)信號傳導（2）。參與細胞間粘附的粘附分子的生化性質(zhì)、相互作用的能量以及沿細胞間連接產(chǎn)生的機械張力已被證明可以控制上皮細胞形狀并確定各種系統(tǒng)中細胞間連接的方向 ( 3 – 6 )。然而，雖然細胞間粘附對上皮拓撲的貢獻一直是許多研究的焦點，但對 ECM 的作用的關(guān)注卻少之又少。 ECM 是一種動態(tài)支架，在形態(tài)發(fā)生過程中主動重塑，在刺激和引導細胞遷移以及定向干細胞命運方面發(fā)揮著重要作用 ( 7 , 8）。 ECM 還可以向上皮細胞傳遞形態(tài)調(diào)節(jié)信號，從而調(diào)節(jié)組織形態(tài)發(fā)生 ( 8 , 9 )。然而，ECM 在單細胞尺度上引導細胞定位的機制仍不清楚。 ECM幾何結(jié)構(gòu)已被證明可以調(diào)節(jié)細胞內(nèi)結(jié)構(gòu) (10) 并為細胞極化提供空間信息 (1,11,12 )，但它如何調(diào)節(jié)細胞定位并從而在空間上組織多細胞結(jié)構(gòu)仍有待研究。

結(jié)果

細胞間連接在缺乏 ECM 的區(qū)域穩(wěn)定。

通過用纖連蛋白微圖案控制 ECM 的位置，研究了 ECM 的空間分布對 MCF10A 細胞間連接定位的影響 ( 13 , 14 )（SI 方法）。為了給細胞間連接提供zui大程度的自由度并盡量減少參與其定位的參數(shù)數(shù)量，我們將分析重點放在有絲分裂后由子細胞形成的細胞雙聯(lián)體上。通過延時顯微鏡在完整的細胞周期中記錄細胞核的空間坐標，并自動量化細胞的定位（圖 S1、電影 S1和SI 方法））。我們測量了核-核軸的角度分布以及細胞運動的時間比例。正如之前工作 ( 15 )所預期的那樣，細胞幾乎是隨機定位的，并且在方形微圖案上彼此穩(wěn)定地旋轉(zhuǎn)（圖 1 A和視頻 S2）。在這種條件下，ECM 存在于細胞雙聯(lián)體的整個輪廓上，并為細胞運動提供連續(xù)的外圍軌道。因為在上皮細胞中，鈣粘蛋白傾向于從富含 ECM 的基極流向不含 ECM 的頂極（16），我們測試了 ECM 的缺失是否可以穩(wěn)定細胞間連接并干擾細胞運動。 [H]形微圖案被設(shè)計成提供兩個沒有ECM的大區(qū)域。與 [square] 上的行為形成鮮明對比的是，[H] 上的大部分細胞雙聯(lián)體根本不移動，從而形成高度穩(wěn)定的構(gòu)型，其中細胞位于間隙的每一側(cè)（圖 1 B和電影） S3）。我們通過對固定細胞上的E-鈣粘蛋白進行染色進一步測試核軸是否垂直于細胞間連接。我們確認細胞間連接位于不存在 ECM 的間隙上方（圖 1 D和E）。

圖 1.