核酸是脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的總稱,是由許多核苷酸單體聚合成的生物大分子化合物,為生命的最基本物質(zhì)之一。核酸是一類生物聚合物,是所有已知生命形式不可少的組成物質(zhì),是所有生物分子中最重要的物質(zhì),廣泛存在于所有動(dòng)植物細(xì)胞、微生物體內(nèi)。
上海漢堯?qū)嶒?yàn)室(上海星瀚耀生物醫(yī)藥科技有限公司)選用YMC-Triart C18(250*4.6mm, 5um)色譜柱對(duì)核酸進(jìn)行HPLC測(cè)定,檢測(cè)需求。
方法來(lái)源:分析實(shí)驗(yàn)室自研
樣品信息
中文名:胞苷酸(CMP) | 中文名:二磷酸胞苷(CDP) | 中文名:三磷酸胞苷(CTP) |
英文名:Cytidine 5'-monophosphate | 英文名:Cytidine-5'-diphosphate | 英文名:Cytidine-5'-triphosphate |
CAS號(hào):63-37-6 | CAS號(hào):63-38-7 | CAS號(hào):65-47-4 |
中文名:腺苷酸(AMP) | 中文名:二磷酸腺苷(ADP) | 中文名:三磷酸腺苷(ATP) |
英文名:Adenosine 5'-monophosphate | 英文名:Adenosine 5'-diphosphate | 英文名:Adenosine 5'-triphosphate |
CAS號(hào):61-19-8 | CAS號(hào):58-64-0 | CAS號(hào):56-65-5 |
色譜條件
色譜柱:YMC-Triart C18, 250*4.6mm, 5um, P/N: TA12S05-2546PTH
流動(dòng)相A:70mM NaH2PO4(pH5.5)
流動(dòng)相B:MeOH
檢測(cè)波長(zhǎng):260nm;
柱 溫:35℃;
進(jìn)樣濃度:1.0mg/ml
稀釋劑:H2O
進(jìn)樣量:5μL
運(yùn)行時(shí)間:15min
后運(yùn)行時(shí)間:5min
洗脫梯度:
T(min) | MP-A% | MP-B% | Flow(ml/min) |
0.00 | 100.0 | 0.0 | 0.5 |
5.50 | 94.5 | 5.5 | 0.5 |
5.51 | 94.5 | 5.5 | 1.5 |
12.50 | 84.0 | 16.0 | 1.5 |
12.51 | 60.0 | 40.0 | 1.5 |
14.50 | 100.0 | 0.0 | 1.5 |
14.51 | 100.0 | 0.0 | 0.5 |
15.00 | 100.0 | 0.0 | 0.5 |
實(shí)驗(yàn)譜圖和數(shù)據(jù)
樣品檢測(cè)譜圖
樣品檢測(cè)數(shù)據(jù)
結(jié)論
選用YMC-Triart C18(250*4.6mm, 5um)色譜柱對(duì)核酸進(jìn)行HPLC測(cè)定,通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相梯度及流速,6種核酸在同一色譜條件中可實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定分離,且分離度均大于1.5,符合檢測(cè)需求。
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