IHC出現(xiàn)假陽性、假陰性等問題該怎么辦?

?免疫組化（IHC）實驗中出現(xiàn)假陽性和假陰性了怎么辦呢？

一、假陽性的處理

1. ?降低一抗?jié)舛?/span>?：通過降低一抗的濃度，可以減少非特異性結(jié)合，從而降低假陽性。通常，降低濃度至能看到陽性表達且能明顯區(qū)分陽性區(qū)域與周圍間質(zhì)即可?。

2. ?調(diào)整封閉條件?：逐步提高封閉條件，從山羊血清到5%BSA+山羊血清，最終至5%脫脂奶。通常調(diào)整至5%BSA+山羊血清即可，不建議輕易使用5%脫脂奶?。

3. ?選擇合適的二抗?：對于動物標本，選擇抗鼠或抗兔的二抗，避免使用通用型二抗，以免種屬間抗原抗體反應引起假陽性?。

二、假陰性的處理

?抗原修復?：通過抗原修復技術(shù)可以增加抗原的暴露，從而提高檢測的靈敏度，減少假陰性?。

三、實驗操作中的常見問題及解決方法

1. ?個體差異?：個體差異可能導致某些人的體內(nèi)存在與抗體相似的物質(zhì)，從而導致假陽性。通過多次重復實驗和嚴格控制實驗條件可以減少這種影響?。

2. ?實驗操作誤差?：樣本污染、操作不規(guī)范等可能導致假陽性。嚴格遵守實驗操作規(guī)程，確保樣本的純凈和操作的準確性可以有效減少這種誤差?。

3. ?試劑質(zhì)量?：試劑的質(zhì)量不穩(wěn)定或過期也可能影響檢測的準確性。使用高質(zhì)量、在有效期內(nèi)的試劑，并嚴格按照說明書操作可以減少這種影響?。

通過以上方法，可以有效減少免疫組化實驗中的假陽性和假陰性問題，提高實驗結(jié)果的準確性和可靠性。

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