HPLC色譜柱,即高效液相色譜柱,是高效液相色譜儀中的關鍵部件,主要由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,也可采用厚壁玻璃或石英管,要求管內壁有很高的光潔度。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,篩板材料為燒結不銹鋼或鈦合金,孔徑取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。
HPLC色譜柱的主要性能指標介紹:
柱效:衡量色譜柱性能的重要指標,反映了色譜柱的分離能力。柱效越高,色譜柱的分離效果越好。柱效與固定相的粒徑、柱長、柱徑等因素有關。
柱壓:色譜柱在運行過程中產生的壓力,與柱內流動相的流速、固定相的粒徑、柱長等因素有關。柱壓越高,色譜柱的運行成本和設備要求越高。
選擇性:色譜柱對不同樣品的分離能力,與固定相的化學性質、樣品的性質等因素有關。選擇性越高,色譜柱對復雜樣品的分離效果越好。
穩(wěn)定性:色譜柱在長時間運行過程中保持性能不變的能力,與固定相的化學穩(wěn)定性、柱的制備工藝等因素有關。穩(wěn)定性越高,色譜柱的使用壽命越長。
重現(xiàn)性:色譜柱在多次運行過程中保持分離效果一致的能力,與固定相的均勻性、柱的制備工藝等因素有關。重現(xiàn)性越高,色譜柱的分析結果越可靠。
在選擇HPLC色譜柱時,需要考慮分離模式、柱長、填料的大小和類型以及色譜填料的材料等因素。不同的分離模式適用于不同的樣品類型和分析需求;柱長的選擇取決于樣品的復雜程度和分離要求;填料的大小和類型決定了色譜柱的分離效率和背壓;色譜填料的材料則決定了色譜柱的選擇性和穩(wěn)定性。
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