熒光分光光度計的的結(jié)構(gòu)組成和工作原理

熒光分光光度計通常由激發(fā)光源、單色器、樣品池和檢測器等部分組成。首先，激發(fā)光源發(fā)出紫外光或藍(lán)紫光，這些光經(jīng)過濾光片后照射到樣品池中。常用的激發(fā)光源包括高壓汞燈和氙燈，它們發(fā)出的光具有穩(wěn)定性和高強度，能確保測量的重復(fù)性和精確度。

在樣品池中，熒光物質(zhì)吸收激發(fā)光后，從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的，會迅速返回基態(tài)，并在這一過程中釋放出一部分能量，以光的形式表現(xiàn)出來，即產(chǎn)生熒光。不同物質(zhì)由于其分子結(jié)構(gòu)的不同，具有各自特別的激發(fā)態(tài)能級分布，因此它們的熒光激發(fā)和發(fā)射光譜也各不相同。

熒光物質(zhì)發(fā)出的熒光經(jīng)過第二個單色器（熒光單色器）的濾過和選擇，只有特定波長的熒光能夠透過并被檢測器接收。單色器的作用在于去除不需要的光，以減少干擾，提高測量的準(zhǔn)確性。

檢測器通常采用光電倍增管，它具有高靈敏度，能夠?qū)⒔邮盏降臒晒庑盘栟D(zhuǎn)換成電信號，并進(jìn)行放大。這些電信號隨后被記錄或顯示出來，形成熒光光譜圖或數(shù)字結(jié)果。

需要注意的是，熒光分光光度計所測得的譜圖通常為表觀光譜，即未經(jīng)過校正的光譜。在大多數(shù)情況下，這種表觀光譜并不影響測試結(jié)果。但在某些特定情況下，如測量熒光量子產(chǎn)率時，則需要采用經(jīng)過校正的真實光譜。

綜上所述，熒光分光光度計通過激發(fā)光源、單色器、樣品池和檢測器等部件的協(xié)同作用，實現(xiàn)了對熒光物質(zhì)的定量分析和光譜掃描。