無(wú)動(dòng)物源基質(zhì)膠|類器官培養(yǎng)水凝膠系統(tǒng)
類器官(Organoids)是由干細(xì)胞或成熟細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下形成的具有三維結(jié)構(gòu)的細(xì)胞團(tuán)塊,它們能夠自我組織并展現(xiàn)出類似器官的復(fù)雜結(jié)構(gòu)和功能。類器官培養(yǎng)在醫(yī)學(xué)研究中具有重要意義,它為研究人類疾病提供了新的平臺(tái),有助于理解疾病機(jī)制、發(fā)現(xiàn)新的藥物靶點(diǎn)、進(jìn)行個(gè)性化醫(yī)療和再生醫(yī)學(xué)研究。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和新材料的開(kāi)發(fā),類器官培養(yǎng)的應(yīng)用前景將更加廣闊。
相對(duì)于普通的細(xì)胞培養(yǎng),在類器官的培養(yǎng)中需要基質(zhì)膠為細(xì)胞的生長(zhǎng)提供“框架”,模擬細(xì)胞外基質(zhì)的復(fù)雜結(jié)構(gòu),為類器官的生長(zhǎng)提供必要的物理支撐。作為類器官培養(yǎng)中重要的材料,基質(zhì)膠也存在著一些固有的缺陷:
1.動(dòng)物源殘留:常用的基質(zhì)膠如Matrigel來(lái)源于小鼠基底膜,可能含有動(dòng)物蛋白成分,可能會(huì)引發(fā)宿主的免疫反應(yīng),影響類器官在醫(yī)學(xué)研究和臨床應(yīng)用中的安全性和有效性。
2.批次差異:由于動(dòng)物個(gè)體差異和生理狀態(tài)的影響,同一動(dòng)物來(lái)源的基質(zhì)膠可能會(huì)存在批次差異,從而影響實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和結(jié)果的可靠性。
3.低穩(wěn)定性:部分基質(zhì)膠在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)軟化、結(jié)構(gòu)變形,導(dǎo)致類器官的結(jié)構(gòu)和功能受到影響。
為了克服基質(zhì)膠的缺陷,研究人員正在探索和開(kāi)發(fā)新的基質(zhì)材料和技術(shù),如人工合成的GLY大分子聚合物基質(zhì)膠、納米超分子自組裝基質(zhì)膠等,這些新材料具有更好的穩(wěn)定性、更低的免疫反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)和更高的批次一致性,有望為類器官培養(yǎng)提供更可靠的三維環(huán)境。
Solarbio提供了新的基質(zhì)材料—類器官培養(yǎng)水凝膠系統(tǒng),以生物合成原料仿細(xì)胞外基質(zhì)微環(huán)境構(gòu)建而成,具有質(zhì)量穩(wěn)定且膠體硬度可自由調(diào)控、無(wú)動(dòng)物源成分、操作便利、高培養(yǎng)穩(wěn)定性、高細(xì)胞回收率等有優(yōu)勢(shì)。適用于各種癌細(xì)胞系及原代細(xì)胞的3D培養(yǎng)、小鼠腫瘤模型構(gòu)建、血管形成等研究。
產(chǎn)品特點(diǎn)
成分清晰:原材料獲FDA批準(zhǔn),以合成生物原料仿細(xì)胞外基質(zhì)微環(huán)境構(gòu)建而成。
高穩(wěn)定性:合成生物原料穩(wěn)定批量生產(chǎn),避免了動(dòng)物個(gè)體差異及生理狀態(tài)的影響。
操作簡(jiǎn)便:室溫操作,30 min內(nèi)完成,常溫運(yùn)輸,4℃儲(chǔ)存。
硬度可控:膠體硬度可自由調(diào)控0.1-25 KPa,符合人體腫瘤組織硬度。
培養(yǎng)穩(wěn)定:無(wú)生長(zhǎng)因子添加,安全可控且重復(fù)性強(qiáng),可用于批量化實(shí)驗(yàn)。
高回收率:回收時(shí)間短,回收率大于98%,回收完整性高達(dá)90%,且無(wú)膠體殘留。
產(chǎn)品應(yīng)用
1.癌細(xì)胞系及原代細(xì)胞的3D細(xì)胞培養(yǎng)
2.小鼠腫瘤構(gòu)建模型的成瘤實(shí)驗(yàn)
3.血管形成等臨床癌癥相關(guān)研究
使用方法
1.使用組織消化液將組織消化后,鏡下觀察細(xì)胞團(tuán)并計(jì)數(shù),取體積0.5 ml,細(xì)胞團(tuán)塊數(shù)約2×106 Cells,以200 g離心5 min,去上清。
2.離心后的細(xì)胞沉淀物,加入0.5 ml B Supplement培養(yǎng)液,重懸細(xì)胞,細(xì)胞團(tuán)塊數(shù)約為2×106 Cells,形成B Supplement細(xì)胞懸液。
3.取0.5 ml A Gel與0.5 ml B Supplement細(xì)胞懸液,1:1混合均勻,使細(xì)胞團(tuán)塊數(shù)約為1×106 Cells,得到A Gel細(xì)胞混合液。
4.取20-50 µl A Gel細(xì)胞混合液,滴于細(xì)胞培養(yǎng)板中,將培養(yǎng)板小心轉(zhuǎn)移至碎冰上或4℃冰箱,5min后膠滴成膠。
5.膠體成膠后,沿培養(yǎng)板孔的側(cè)壁添加1ml預(yù)冷C Buffer(1X),蓋過(guò)步驟4的膠滴,置于碎冰上,靜置15 min交聯(lián)。
6.交聯(lián)后,小心移除C Buffer(1X)并置換為人乳腺癌類器官培養(yǎng)基。
7.將細(xì)胞培養(yǎng)板置于37 ℃二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi),進(jìn)行7-14天的培養(yǎng),并觀察類器官的形成。每2-3天更換培養(yǎng)液。
類器官培養(yǎng)水凝膠試劑盒使用方法
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