藥敏試驗培養(yǎng)基的選擇對藥敏結(jié)果的影響因素

藥敏試驗培養(yǎng)基的選擇具有一定的原則和要求，不以個人經(jīng)驗或愛好而更改。為了使臨床試驗和醫(yī)療保健服務(wù)水平具備一致的標(biāo)準(zhǔn)，許多國家或機(jī)構(gòu)制定了不同的參照標(biāo)準(zhǔn)。由于參照標(biāo)準(zhǔn)有所差異，故藥敏培養(yǎng)基的要求也有所不同。我國藥敏試驗結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)參照美國CLSI標(biāo)準(zhǔn)文件，則要求除了特殊菌群，K-B法所用的培養(yǎng)基必須是M-H培養(yǎng)基；英國參照的標(biāo)準(zhǔn)BSAC則要求培養(yǎng)基為ISO培養(yǎng)基，而M-H營養(yǎng)瓊脂只適用于葡萄球菌的藥敏試驗。因此在工作中，我們要嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膮⒄誄LSI，根據(jù)不同菌群的需求選擇合適、正確的藥敏培養(yǎng)基。

　　培養(yǎng)基的成分和質(zhì)量是保證藥敏結(jié)果準(zhǔn)確性的先決條件。培養(yǎng)基對藥敏結(jié)果的影響因素具體如下：

　　1、pH：pH的變化可導(dǎo)致抑菌圈直徑變大或變小。

　　2、能拮抗菌藥活性的物質(zhì)：如鈣、鎂離子能降低氨基糖苷類藥物的抗菌活性。

　　3、厚度：標(biāo)準(zhǔn)厚度為4mm,厚度>4mm，抑菌圈則會變小，<4mm,則會變小。

　　4、濕度：使用藥物平皿前一般先在室溫平衡半個小時，使培養(yǎng)基表面干燥，濕度過高不利于細(xì)菌的生長或?qū)咕幤鸬较♂屪饔谩?/span>

　　5、硬度：硬度過高不利于抗菌藥在瓊脂中的擴(kuò)散，可導(dǎo)致抑菌圈直徑變小。

　　6、營養(yǎng)條件：營養(yǎng)條件太差不利于細(xì)菌的生長，抑菌圈直徑變大；反之，培養(yǎng)及營養(yǎng)條件太好會讓抑菌圈直徑變小。

　　將這些原理和原則解說后，針對他們對話中的問題，我一一進(jìn)行了剖析：

　　根據(jù)CLSI，絕大多數(shù)細(xì)菌藥敏試驗瓊脂均為標(biāo)準(zhǔn)的M-H瓊脂，M-H瓊脂基本不含有抑制磺胺類藥物和四環(huán)素類藥物抗菌活性的物質(zhì)，可滿足大多數(shù)細(xì)菌的生長需要，腸球菌對營養(yǎng)要求不高且生長速度較快，因此可選用M-H瓊脂（MHA），而不是血平皿。對于大多數(shù)細(xì)菌，MHA是不需要添加羊血，血液或血清中的蛋白會不同程度結(jié)合抗菌藥分子，影響了抗菌藥物的活性，如羊血中的某些成分可抑制磺胺類藥物和四環(huán)素類藥物抗菌活性，同時也可影響新生霉素、萘夫西林及頭孢菌對腸球菌的藥敏結(jié)果。

　　溶血鏈球菌、肺炎鏈球菌等營養(yǎng)要求高的苛養(yǎng)菌則需要使用M-H瓊脂+5%脫纖維羊血培養(yǎng)基，也叫M-H藥敏試驗血瓊脂平板（MHBA）。MHBA與普通的分離細(xì)菌的血平板或者哥倫比亞血平板（CNA）雖然長相相似，但配方及產(chǎn)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（如pH、濕度等）均不一樣，是不能相互代替使用的。為了比較肺炎鏈球菌ATCC49619在MHBA和 CNA培養(yǎng)基上的藥敏結(jié)果，在其他條件均一致的情況下我們分別用MHBA和CNA做了藥敏試驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CNA的藥敏結(jié)果抑菌圈直徑偏大，細(xì)菌生長情況較差，從而導(dǎo)致“假敏感"結(jié)果。

　　因此，作為一名合格的微生物檢驗人員，我們應(yīng)該時刻遵守操作規(guī)程，牢記標(biāo)準(zhǔn)要求，熟讀規(guī)則原理，杜絕含糊不清、似是而非，才能確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。