產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>操作使用>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

蛋白印跡儀的操作步驟通常包括哪些?

來源:重慶斯成銳科技有限公司   2025年01月09日 16:54  
  蛋白印跡儀是一種用于蛋白質(zhì)印跡實驗的醫(yī)療或?qū)嶒炘O(shè)備,利用特定抗體與目標(biāo)蛋白質(zhì)結(jié)合,通過一系列步驟完成蛋白質(zhì)的分離、轉(zhuǎn)移、固定、染色和成像。這些步驟通常包括樣品制備、電泳分離、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移、固定、染色、成像和分析等。
 
  蛋白印跡儀主要用于生物樣本的洗滌和孵育,能夠全自動化完成“封閉-洗膜-孵育一抗-洗膜-孵育二抗-洗膜”全過程。通過特定的抗體與蛋白質(zhì)結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物,進(jìn)而實現(xiàn)蛋白質(zhì)的定性和半定量檢測。
 
  操作步驟通常包括:
 
  準(zhǔn)備工作:清潔并消毒工作臺,穿戴適當(dāng)?shù)膫€人防護裝備,并準(zhǔn)備好所有必要的試劑、樣品和耗材。
 
  樣品加載:取出電泳膠片,并將其放置在印跡轉(zhuǎn)移槽中。將需要測試的蛋白樣品加入到相應(yīng)孔位中。
 
  膠片轉(zhuǎn)移:關(guān)閉槽蓋后,將印跡轉(zhuǎn)移槽放置在電泳槽中心位置。設(shè)置合適的參數(shù)(如時間、溫度等),啟動轉(zhuǎn)移程序進(jìn)行蛋白質(zhì)向膠片上轉(zhuǎn)移。
 
  洗滌過程:完成蛋白質(zhì)傳輸后,取出膠片并將其放入洗滌緩沖液中輕輕搖動,以去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)。根據(jù)實驗需求,可重復(fù)該步驟多次。
 
  特異性結(jié)合:將膠片放入含有特定抗體的洗滌緩沖液中,并在適當(dāng)?shù)臈l件下孵育一段時間,以實現(xiàn)抗原與抗體的特異性結(jié)合。
 
  洗凈步驟:將膠片移至新的洗滌緩沖液中進(jìn)行反復(fù)洗凈,在每個洗滌周期結(jié)束后換用新的緩沖液。確保完全去除非特異性結(jié)合物和雜質(zhì)。
 
  顯色反應(yīng):添加顯色試劑到膠片上,觀察并記錄顏色變化。顯色時間應(yīng)注意控制,避免過度顯色造成信號失真或影響結(jié)果解讀。
 
  停止反應(yīng):使用適當(dāng)?shù)脑噭┗蚍椒ㄍV姑富钚缘认嚓P(guān)過程。
 
  影像捕獲與分析:使用相應(yīng)設(shè)備(如CCD相機)拍攝膠片圖像,并保存為數(shù)字文件??梢允褂脠D像分析軟件對圖像進(jìn)行定量和質(zhì)量評估。
 
  清理工作臺與維護設(shè)備:完成操作后,清潔工作臺并處理廢棄物和使用過的耗材。根據(jù)制造商提供的指導(dǎo)對設(shè)備進(jìn)行定期維護。

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618