血清25-羥基維生素D2和D3檢測(cè) 同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

來源：RESTEK 瑞思泰康科技（北京）有限公司 2025年01月13日 10:39

引言

Restek

維生素 D 是一種脂溶性維生素,它對(duì)維持人體鈣、磷代謝平衡起著重要作用。維生素 D 以維生素 D₂ 和維生素 D₃兩種形式存在，它們分別經(jīng)過代謝形成 25-羥基維生素 D₂ 和 D₃，這兩種代謝物是評(píng)估維生素 D 代謝的生物標(biāo)志物。

缺乏維生素 D 會(huì)導(dǎo)致鈣吸收障礙，從而引發(fā)骨質(zhì)疏松、肌肉無力、骨折等健康問題，因此臨床實(shí)踐中對(duì)維生素 D 的檢測(cè)需求急劇增加。

對(duì)此，2024 年 5 月，國家衛(wèi)健委發(fā)布了衛(wèi)生行業(yè)新標(biāo)準(zhǔn)《血清 25-羥基維生素 D₂ 和 D₃ 的檢測(cè)同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》，該標(biāo)準(zhǔn)將于 2024 年 11 月 1 日起實(shí)施！

血清25-羥基維生素D2和D3檢測(cè) 同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

Restek 解決方案

該標(biāo)準(zhǔn)中推薦的色譜柱為五氟苯基柱或 C18。由于 25-羥基維生素 D₂ 和 D₃ 的差向異構(gòu)體（ 3-EPI-25-羥基維生素 D₂ 和 D₃），對(duì) 25-羥基維生素 D₂ 和 D₃ 的總濃度有顯著貢獻(xiàn)，而這兩種差向異構(gòu)體的生物活性遠(yuǎn)低于主要代謝物;因此，必須在色譜上將 25-羥基維生素 D₂/ D₃ 與它們的差向異構(gòu)體分離，才可以避免維生素 D 檢測(cè)水平偏高問題的出現(xiàn)。

使用 C18 色譜柱的限制主要是：生物標(biāo)志物及其差向異構(gòu)體不能全分離或分析時(shí)間比較長。Raptor PFPP 可以在 5 分鐘內(nèi)全分離維生素 D 的生物標(biāo)志物和差向異構(gòu)體，因此是這個(gè)應(yīng)用的更好選擇。

Restek 色譜圖 LC_CF0644

色譜條件
色譜柱	Raptor FluoroPhenyl (cat.# 9319A1E)
規(guī)格	100 mm x 3 mm ID
粒徑	2.7 μm
柱溫	30 ℃
樣品
溶劑	水 : 甲醇 = 50 : 50
濃度	25-50 ng/ mL
進(jìn)樣量	5 μL
流動(dòng)相	A：水（0.1% 甲酸） B：甲醇

時(shí)間(min)	流速(mL/min)	%A	%B
0.00	0.6	25	75
4.00	0.6	15	85
4.10	0.6	0	100
5.00	0.6	0	100
5.01	0.6	25	75
7.00	0.6	25	75

檢測(cè)器	MS/MS
離子化方式	ESI+
掃描方式	MRM
儀器	HPLC

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