GM24143 人B淋巴細胞 細胞來源 傳代比例 凍存條件

基本信息

• 細胞來源：GM24143 細胞系來源于一位74歲女性的外周血B淋巴細胞，通過Epstein-Barr病毒（EBV）轉(zhuǎn)化而成。
• 細胞類型：該細胞系屬于轉(zhuǎn)化細胞系，具有懸浮生長的特性。

培養(yǎng)條件

• 培養(yǎng)基：RPMI-1640培養(yǎng)基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%雙抗。
• 培養(yǎng)條件：37℃，5% CO?條件下培養(yǎng)。
• 傳代比例：建議1:2至1:3傳代，2-3天換液一次。
• 凍存條件：凍存液配方為10% DMSO + 40% FBS + 50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液，液氮保存。

特點

• 基因組信息：GM24143 細胞系已完成基因組測序，屬于“基因組標準樣品”（Genome in a Bottle）項目的一部分。
• 細胞系穩(wěn)定性：細胞系遺傳穩(wěn)定，適用于長期研究。
• 質(zhì)檢情況：細胞經(jīng)檢測不含細菌、真菌和支原體等微生物污染。

應(yīng)用

• GM24143 細胞系主要用于基因組學、表觀遺傳學和免疫學研究，尤其適合研究B淋巴細胞的功能和基因表達調(diào)控。
• 該細胞系還可用于藥物篩選和細胞毒性實驗。

注意事項

1. 接收細胞后的操作：
• 收到細胞后，擰松瓶蓋，豎立培養(yǎng)8小時或過夜。
• 細胞沉底后，吸除上層液體，轉(zhuǎn)移細胞至新培養(yǎng)瓶，加入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
2. 培養(yǎng)過程：
• 定期觀察培養(yǎng)基pH值和細胞密度，每周換液2-3次。
• 細胞密度大于2×10?/ml時，可進行傳代或凍存。
3. 細胞狀態(tài)反饋：
• 如細胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中出現(xiàn)問題，請及時聯(lián)系供應(yīng)商，并提供細胞照片以便處理

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??細胞常規(guī)說明:
??培養(yǎng)條件:89%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
??凍存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液
??細胞質(zhì)檢情況:不含細菌、真菌、支原體等微生物污染
??傳代建議:1:2~1:3傳代,2~3天換液1次
??特別提醒:簽收細胞后,如細胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問題,煩請當天盡快聯(lián)系,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),請務(wù)必重視。
??懸浮細胞接收后的操作流程與注意事項
??1.如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室
??2.擰松瓶蓋,細胞瓶豎立培養(yǎng)8h(或過夜)
??3.待細胞沉底后吸除上層液體(含碎片殘渣,請小心操作),然后吸取沉底的細胞層(2ML左右轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶,加入新鮮的完(全)培養(yǎng)基(如細胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%)繼續(xù)培養(yǎng)
??懸浮細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
??1.將培養(yǎng)瓶/皿中的細胞重懸混勻
??2.吸取2/3或者一半混勻后的細胞懸液到新的培養(yǎng)瓶/皿
??3.分別在原瓶/皿和新分瓶的培養(yǎng)瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養(yǎng)基,使細胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
??4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況和細胞密度,定期半量換液(每周2-3次),待細胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重復(fù)1項操作或者凍存
??貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
??1.收到細胞當天盡快更換新鮮完(全)培養(yǎng)基,第二天再進行消化處理
??2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完(全)培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完(全)培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
??3.若出現(xiàn)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
??貼壁細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
??1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰(酶)進行消化細胞(注意把握消化時間)
??2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰(酶),加6~8ml 完(全)培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
??3.取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐?全)培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
??4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)17項作或者凍存

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