科學(xué)前沿：柱后衍生在科研項(xiàng)目中的應(yīng)用

背景

柱后衍生的方法在分析行業(yè)有著廣泛的使用，一般用于在產(chǎn)品質(zhì)檢過(guò)程中的定性及定量測(cè)定，例如，水中的草甘膦及氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)殘的測(cè)定；海洋生物中毒素的測(cè)定；糧油產(chǎn)品中黃曲霉的測(cè)定，食品、藥品、飼料等氨基酸的測(cè)定等，日常的應(yīng)用比較廣泛。

除此之外，柱后衍生的方法其實(shí)科研項(xiàng)目的研究中也發(fā)揮著不可小覷的作用，輔助ICP-MS、LC-MS及TOF等進(jìn)行后續(xù)提取物的化學(xué)及生物性能的分析，以確認(rèn)最后的走向。本文介紹了幾種柱后方法在科研項(xiàng)目中的應(yīng)用，涉及到美容，生物醫(yī)藥等行業(yè)。

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案例一

01

2023年7月由Huiji Zhou  , Tingzhao Li  , Bo Li  , Shuai Sun發(fā)表在Heliyon上的，關(guān)于通過(guò)HPLC柱后生物活性測(cè)定簽訂芍藥花提取物、酪氨酸酶抑制劑和自由基清除劑的皮膚健康特性，其中他們運(yùn)用UPLC-PDA-ESI-QTOF-MS/MS初步鑒定了27種化合物，隨后應(yīng)用柱后衍生化法進(jìn)行了在線抗氧化劑的分析，通過(guò)與底物的柱后反應(yīng)評(píng)估各個(gè)化合物對(duì)酪氨酸酶的抑制作用，設(shè)備模型如下：

圖1：應(yīng)用柱后衍生化法進(jìn)行在線抗氧化劑分析的設(shè)備模型

結(jié)論

PLPF的水提取物和乙醇提取物均對(duì)TYR、COX-2、膠原酶和蛋白糖化具有顯著的抗氧化和抑制作用。通過(guò)UPLC/PDA-QTOF-ESI-MS/MS初步鑒定出27種化合物，其中包括4種單萜苷、六種酚類(lèi)、六種單寧、十種類(lèi)黃酮和一種羥基肉桂酰胺。該研究對(duì)于基于POBA的在線抗氧化劑和TYR抑制劑篩選分析的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用具有重要參考價(jià)值，可加速藥物發(fā)現(xiàn)進(jìn)程?；谏锘钚缘暮Y選分析與傳統(tǒng)的定量生化分析相結(jié)合表明，沒(méi)食子酸衍生物是PLPF 提取物的抗氧化和抗TYR能力的主要貢獻(xiàn)者。主要類(lèi)黃酮往往是AGE的協(xié)同抑制劑，而沒(méi)食子酸衍生物也可能負(fù)責(zé)抑制膠原酶和COX-2。PLPF及其主要化合物被證明是作為新型藥物和美容劑開(kāi)發(fā)的有希望的候選者。

02

2023年波蘭華沙大學(xué)化學(xué)學(xué)院的 Elzbieta Sobolewska，Magdalena Tyszkiewicz，Roman Blaszczyk and Magdalena Biesaga運(yùn)用茜草色素作為衍生劑進(jìn)行OATD-02的測(cè)定（OATD-02是一種處于臨床開(kāi)發(fā)中的抗癌精氨酸酶抑制劑， 是一種新型硼酸衍生物）。

OATD-02 的色譜分析普遍存在問(wèn)題，因?yàn)樵摲肿拥淖贤饩€吸收較弱，而本文中的實(shí)驗(yàn)中的衍生化反應(yīng)基于OATD-02中的硼酸與茜素溶液之間的反應(yīng)，且實(shí)驗(yàn)方案在選擇性、線性、回收率 （>99%）、精密度 （RSD：0.6%）、靈敏度 （LOD：20 μg/mL 和 LOQ：50 μg/mL）、溶液穩(wěn)定性和穩(wěn)定性方面均表現(xiàn)得當(dāng)。

圖2：茜素與OATD-02反應(yīng)形成熒光復(fù)合物

圖3：OATD-02粗混合物與所有合成雜質(zhì)（紅線）和空白（黑線）的色譜圖比較

03

西南化工大學(xué)的彭敬東博士課題組發(fā)表了基于高效液相色譜-共振瑞利散射法測(cè)定人尿液中的法莫替丁和雷尼替丁，雷尼替?。≧NTD）和法莫替丁（FMTD）均為H2受體阻滯劑，是抑制胃酸分泌的藥物，具有抑制胃酸和胃蛋白酶活性，通過(guò)改善胃粘膜的微循環(huán)促進(jìn)細(xì)胞再生和修復(fù)的作用，主要用于治療胃和十二指腸潰瘍，但大量服用會(huì)損傷腎功能、性腺功能和中樞神經(jīng)，對(duì)人體健康產(chǎn)生不利影響。RNTD和FMTD的半衰期約為2~3 h，主要通過(guò)尿液排泄，尿液中的藥物濃度變化幅度大且快，因此研究其在尿液樣品中的測(cè)定方法對(duì)于臨床用藥和科學(xué)研究具有重要意義

本文研究發(fā)現(xiàn)在pH 4.6的BR緩沖溶液中，RNTD和FMTD能與金屬離子Pd（II.）螯合形成陽(yáng)離子，再與染料赤蘚紅（Ery）在靜電引力和疏水作用下形成三元離子締合物，導(dǎo)致整個(gè)體系的RRS信號(hào)急劇增強(qiáng)。基于此，將高效液相色譜作為分離裝置，通過(guò)柱后衍生系統(tǒng)與共振瑞利散射反應(yīng)裝置聯(lián)用，經(jīng)HPLC分離后的RNTD和FMTD，再與柱后衍生系統(tǒng)引入的探針在反應(yīng)裝置中締合成離子化合物，然后記錄得到RRS信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)RNTD和FMTD的分析。

圖4：HPLC-RRS反應(yīng)裝置示意圖

圖5：法莫替丁和雷尼替丁標(biāo)準(zhǔn)溶液（A）及實(shí)際人體尿液的色譜圖（B）

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結(jié)論

綜合上述文獻(xiàn)的內(nèi)容，柱后衍生的方法不僅可以用于傳統(tǒng)應(yīng)用的定性定量的測(cè)試，亦可在科研方面發(fā)揮重大的作用，Pickering，作為40年的老品牌，愿懷抱開(kāi)放的態(tài)度與任何有需求的科學(xué)家們合作，提供定制化的服務(wù)，助力各個(gè)科研項(xiàng)目的順利發(fā)展。

在傳統(tǒng)的應(yīng)用方面，追求更加優(yōu)秀、高性價(jià)比的開(kāi)發(fā)方法以及穩(wěn)定的設(shè)備也一直是我們的宗旨，目前我們一直在不斷挖掘Pickering柱后衍生儀可測(cè)試的應(yīng)用，歡迎各位客戶共同探討。

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Pickering柱后衍生儀

Pickering柱后衍生儀使用簡(jiǎn)單、檢出限低、重復(fù)性好、維護(hù)及使用成本低，深受使用者喜歡。

Pickering Onyx PCX柱后衍生儀每個(gè)組件都是為柱后分析專門(mén)設(shè)計(jì)，是一款具有柱溫梯度程序的柱后衍生系統(tǒng)，儀器布局以易用性、快速監(jiān)控、快速服務(wù)為核心。可以用來(lái)進(jìn)行氨基酸、亞硝酸鹽、霉菌毒素、抗生素、六價(jià)鉻等特殊應(yīng)用的分析也可進(jìn)行氨基甲酸酯、草甘膦、黃曲霉等常規(guī)應(yīng)用分析。

Pickering Vector PCX是繼Onyx PCX后柱后衍生系列的優(yōu)質(zhì)選擇。Vector柱后衍生適合大多數(shù)應(yīng)用，擁有內(nèi)置無(wú)脈沖阻尼系統(tǒng)、自動(dòng)活塞清洗系統(tǒng)、電子流速控制等，可以與任何液相產(chǎn)品聯(lián)用，為客戶測(cè)試提供更多選擇性，且操作簡(jiǎn)便，測(cè)試結(jié)果穩(wěn)定可靠。

如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣，可隨時(shí)聯(lián)系德祥科技。

Pickering

Pickering是德祥集團(tuán)資深合作伙伴之一。美國(guó)Pickering Laboratories公司是一家全球?qū)I(yè)提供人工測(cè)試體液和柱后衍生化學(xué)試劑、色譜柱、分析方法等柱后衍生分析整體解決方案的機(jī)構(gòu)，其不斷創(chuàng)新及良好的信譽(yù)被眾多的美國(guó)政府機(jī)構(gòu)如EPA、ATF、FDA、AOAC和世界著名的廠商所認(rèn)可。

德祥科技

德祥科技有限公司成立于1992年，總部位于中國(guó)香港特別行政區(qū)，分別在越南、廣州、上海、北京設(shè)立分公司。主要服務(wù)于大中華區(qū)和亞太地區(qū)——在亞太地區(qū)有27個(gè)辦事處和銷(xiāo)售網(wǎng)點(diǎn)，5個(gè)維修中心和2個(gè)樣機(jī)實(shí)驗(yàn)室。

30多年來(lái)，德祥一直深耕于科學(xué)儀器行業(yè)，主營(yíng)產(chǎn)品有實(shí)驗(yàn)室分析儀器、工業(yè)檢測(cè)儀器及過(guò)程控制設(shè)備，致力于為新老客戶提供更完善的解決方案。公司業(yè)務(wù)包含儀器代理，維修售后，實(shí)驗(yàn)室咨詢與規(guī)劃，CRO凍干工藝開(kāi)發(fā)服務(wù)以及自主產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、售后。與高校、科研院所、政府機(jī)構(gòu)、檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)及企業(yè)保持密切合作，服務(wù)客戶覆蓋制藥、醫(yī)療、商業(yè)實(shí)驗(yàn)室、工業(yè)、環(huán)保、石化、食品飲料和電子等各個(gè)行業(yè)及領(lǐng)域。

2009至2021年間，德祥先后榮獲了“影響力經(jīng)銷(xiāo)商”、“年度最佳代理商“、”年度最高銷(xiāo)售獎(jiǎng)“等殊榮。我們始終秉承誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)的理念，致力于成為優(yōu)秀的科學(xué)儀器供應(yīng)商，為此我們從未停止前進(jìn)的腳步。

我們始終相信，每一天都在使這個(gè)世界變得更美好！