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超高效液相色譜是一種高效、快速的分析分離技術(shù)，通常由高壓溶劑輸送單元、低死體積的色譜系統(tǒng)、快速的檢測(cè)器、快速自動(dòng)進(jìn)樣器和高速數(shù)據(jù)采集、控制系統(tǒng)等組成。這些組件的協(xié)同作用，使得超高效液相色譜能夠?qū)崿F(xiàn)高效、快速、靈敏的分析分離。廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、環(huán)保、石化、食品、化工等行業(yè)。在醫(yī)藥領(lǐng)域，它可用于藥物分析、藥物代謝研究等；在環(huán)保領(lǐng)域，它可用于水質(zhì)監(jiān)測(cè)、空氣污染物分析等；在石化領(lǐng)域，它可用于石油產(chǎn)品分析、催化劑評(píng)價(jià)等；在食品和化工領(lǐng)域，它可用于食品添加劑檢測(cè)、產(chǎn)品質(zhì)量控制等。
超高效液相色譜的結(jié)構(gòu)主要包括以下幾個(gè)部分：
1、輸液系統(tǒng)
高壓輸液泵：是UPLC系統(tǒng)中最重要的部件之一，其功能是將流動(dòng)相和樣品通過色譜分離柱和檢測(cè)系統(tǒng)。高壓輸液泵應(yīng)具備流量穩(wěn)定、耐高壓、耐腐蝕等特性，以確保分析的準(zhǔn)確性和可靠性。常見的輸液泵有往復(fù)式柱塞泵、隔膜泵等。
梯度洗脫裝置：用于在分析過程中實(shí)現(xiàn)流動(dòng)相組成的連續(xù)變化，以提高分離效果。梯度洗脫可以通過低壓梯度或高壓梯度的方式實(shí)現(xiàn)，根據(jù)不同的分析需求選擇合適的梯度洗脫方式。
在線脫氣機(jī)：用于去除流動(dòng)相中溶解的氣體，防止氣泡對(duì)分析結(jié)果產(chǎn)生干擾。常用的脫氣方法有超聲波振蕩脫氣、惰性氣體鼓泡吹掃脫氣和在線真空脫氣等。
2、進(jìn)樣系統(tǒng)
進(jìn)樣器：將待分析樣品引入色譜系統(tǒng)，包括手動(dòng)進(jìn)樣器和自動(dòng)進(jìn)樣器。自動(dòng)進(jìn)樣器可以實(shí)現(xiàn)高通量、自動(dòng)化的分析操作，提高分析效率和準(zhǔn)確性。進(jìn)樣器應(yīng)具備良好的密封性、死體積小、重復(fù)性好等特點(diǎn)，以保證進(jìn)樣的精度和穩(wěn)定性。
針內(nèi)進(jìn)樣探頭：可減少進(jìn)樣時(shí)樣品的擴(kuò)散和交叉污染，提高進(jìn)樣的準(zhǔn)確度和重復(fù)性。
壓力輔助進(jìn)樣技術(shù)：利用壓力將樣品快速、準(zhǔn)確地注入色譜柱，進(jìn)一步提高進(jìn)樣效率和分離效果。
3、分離系統(tǒng)
色譜柱：是UPLC的核心部件，由柱管和固定相組成。柱管一般采用直型不銹鋼管，內(nèi)部填充有固定相填料。固定相填料的粒徑通常小于2μm，甚至達(dá)到1.7μm以下，以實(shí)現(xiàn)更高的分離效率。色譜柱的長(zhǎng)度一般在10-30cm之間，內(nèi)徑為2-5mm。
保護(hù)柱：安裝在色譜柱之前，用于保護(hù)色譜柱免受樣品中的雜質(zhì)和顆粒物質(zhì)的污染，延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。保護(hù)柱的填料粒徑較大，一般為5-10μm。
柱溫控制器：用于控制色譜柱的溫度，保持柱溫的穩(wěn)定。柱溫的變化會(huì)影響固定相的性質(zhì)和分離效果，因此需要精確控制柱溫。
4、檢測(cè)系統(tǒng)
檢測(cè)器：用于檢測(cè)經(jīng)色譜柱分離后的樣品組分，并將濃度變化轉(zhuǎn)化為光學(xué)或電學(xué)信號(hào)。常見的檢測(cè)器有紫外-可見吸收檢測(cè)器、二極管陣列檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器等。不同的檢測(cè)器具有各自的適用范圍和特點(diǎn)，可根據(jù)分析需求選擇合適的檢測(cè)器。
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：將檢測(cè)器檢測(cè)到的信號(hào)進(jìn)行采集、處理和分析，得到樣品的色譜圖和相關(guān)數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)通常包括計(jì)算機(jī)軟件和硬件設(shè)備，能夠?qū)崿F(xiàn)數(shù)據(jù)的采集、存儲(chǔ)、處理、分析和報(bào)告生成等功能。
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