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奧林巴斯CKX53正置生物教學(xué)顯微鏡的使用技巧

來源:北京長恒榮創(chuàng)科技有限公司   2025年02月11日 17:05  

以下是奧林巴斯 CKX53 正置生物教學(xué)顯微鏡的一些使用技巧:


奧林巴斯CKX53顯微鏡樣品準(zhǔn)備技巧

切片制作:如果觀察的是組織切片,切片要盡量切得薄而均勻,厚度一般在 5-10 微米左右,這樣光線更容易透過,圖像更清晰。例如觀察植物葉片的葉肉細(xì)胞,切片過厚會導(dǎo)致細(xì)胞重疊,難以看清細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)。

樣品固定與染色:對于細(xì)胞等樣品,固定可以防止細(xì)胞變形或移動,便于觀察。染色時要根據(jù)觀察對象選擇合適的染色劑和染色時間。如觀察細(xì)胞核時,可用甲基綠 - 吡羅紅染液,染色 5-10 分鐘,能使細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色,便于區(qū)分。


奧林巴斯CKX53顯微鏡光源調(diào)節(jié)技巧

根據(jù)樣品特性調(diào)節(jié):如果樣品本身顏色較淺或透明度較高,如透明的微生物或細(xì)胞,光源亮度應(yīng)適當(dāng)調(diào)低,避免光線過強導(dǎo)致圖像發(fā)白,失去細(xì)節(jié);對于顏色較深或不透明的樣品,則需要適當(dāng)增加光源亮度。

調(diào)節(jié)色溫:可根據(jù)觀察需求調(diào)整色溫,一般來說,觀察活細(xì)胞等需要真實色彩還原的樣品時,選擇接近自然光的色溫;觀察熒光樣品時,可根據(jù)熒光顏色選擇合適的色溫來增強對比度。


奧林巴斯CKX53顯微鏡聚焦與成像技巧

低倍鏡找視野:先用低倍物鏡(如 4X 或 10X)找到樣品的大致位置和輪廓,將感興趣的區(qū)域移至視野中央,低倍鏡下視野范圍大,更容易找到目標(biāo)。

高倍鏡調(diào)清晰:轉(zhuǎn)換到高倍物鏡(如 40X 或 100X)后,使用細(xì)調(diào)焦旋鈕緩慢調(diào)節(jié)焦距,使圖像達(dá)到最佳清晰度。在高倍鏡下,微小的焦距變化都會對圖像清晰度產(chǎn)生很大影響,所以調(diào)節(jié)要格外小心。

利用景深:對于有一定厚度的樣品,可以通過微調(diào)焦距,觀察樣品不同層面的結(jié)構(gòu),利用景深來獲取更多信息。


奧林巴斯CKX53顯微鏡觀察方法選擇技巧

明場觀察:適用于觀察具有明顯顏色和形態(tài)差異的樣品,如染色后的細(xì)胞、組織切片等。調(diào)整孔徑光闌可改變圖像對比度,縮小光闌可增加對比度,但會降低亮度。

相襯觀察:對于透明或折射率差異小的樣品,如活細(xì)胞,相襯觀察能將細(xì)胞的厚度、折射率等差異轉(zhuǎn)化為可見的明暗對比,更清晰地觀察細(xì)胞的形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)。使用時要將相襯環(huán)準(zhǔn)確轉(zhuǎn)入光路,并調(diào)節(jié)聚光鏡和孔徑光闌。

熒光觀察:如果樣品進(jìn)行了熒光標(biāo)記,選擇合適的熒光激發(fā)塊和濾光片,根據(jù)熒光強度調(diào)節(jié) ND 濾鏡,避免熒光過強或過弱影響觀察效果。同時,要注意熒光的淬滅問題,盡量縮短觀察時間。


奧林巴斯CKX53顯微鏡圖像記錄與分析技巧

拍照參數(shù)設(shè)置:如果使用相機連接顯微鏡進(jìn)行拍照,要根據(jù)樣品的亮度、顏色等設(shè)置合適的曝光時間、增益、白平衡等參數(shù),以獲得高質(zhì)量的圖像。

圖像測量與分析:利用顯微鏡配套軟件中的測量工具,可對樣品的長度、面積、角度等進(jìn)行測量。還可以進(jìn)行圖像拼接、對比度調(diào)整、色彩平衡等處理,以便更好地展示和分析樣品特征。


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