VivaCell特級(jí)血清C04001-500的優(yōu)勢(shì)之處
VivaCell特級(jí)血清C04001-500的優(yōu)勢(shì)之處
產(chǎn)品名稱:特級(jí)胎牛血清 C04001-500
適用:絕大多數(shù)癌細(xì)胞和無(wú)限細(xì)胞系(如:肝癌、乳腺癌、神經(jīng)母瘤、結(jié)腸癌、宮頸癌)
1、如何解凍血清呢?
血清解凍需采用逐步解凍法:將血清首先置于2-8℃冰箱中12-24小時(shí)使之緩慢部分溶解,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍,這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。
2、如何正確保存血清呢?
需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃以下的冰箱(未開(kāi)封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)1個(gè)月,若一次無(wú)法用完一瓶,建議將血清無(wú)菌分裝并冷凍。
3、什么是熱滅活,有必要作熱滅活嗎?
熱滅活溶解細(xì)胞是指以56℃,30分鐘水浴處理已經(jīng)解凍的血清,使血清中的補(bǔ)體滅活。
激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞、刺激平滑肌收縮,刺激細(xì)胞和血小板釋放組胺以及激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。研究人員用多個(gè)批號(hào)的血清作過(guò)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn),結(jié)果顯示,即使是未稀釋的血清,也不會(huì)使紅細(xì)胞溶解;另一方面,細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)顯示,多數(shù)細(xì)胞在使用熱滅活血清培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)速率降低,原因是高溫處理影響了血清的質(zhì)量。除此之外,滅活后的血清,顆粒狀沉淀物會(huì)顯著增加。
在免疫學(xué)研究中,培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。
建議:若非必須,不要對(duì)血清進(jìn)行熱滅活。不僅能節(jié)約時(shí)間,還能確保血清的質(zhì)量。
4、如何正確的進(jìn)行熱滅活呢?
將需要進(jìn)行處理的血清置于56℃水浴30分鐘,建議加放空白對(duì)照(同體積水)使用溫度計(jì)測(cè)溫,以測(cè)得溫度為56℃時(shí)為計(jì)時(shí)起始點(diǎn),加熱過(guò)程中可不時(shí)輕度旋轉(zhuǎn)混勻血清。
5、為何血清存在批間差?
因?yàn)檠鍋?lái)源于動(dòng)物,其組成成分有1000種左右,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。每個(gè)批號(hào)的組分和百分比含量都是不固定的,所有批間差是可能存在的。 建議先進(jìn)行批號(hào)測(cè)試,篩選出合適的批號(hào),備好庫(kù)存(血清未開(kāi)封時(shí),在-20℃可保存5年)。如需更換血清批次或產(chǎn)地,建議先試用再訂購(gòu)。
6、需要對(duì)新買的血清進(jìn)行過(guò)濾嗎?
血清在ISO13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn),經(jīng)過(guò)3次0.1μm過(guò)濾,出廠經(jīng)過(guò)檢測(cè)并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試及無(wú)菌檢測(cè),污染幾率非常低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性,根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測(cè),結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買來(lái)的血清不需要再次進(jìn)行過(guò)濾。
7、如何挑選適合細(xì)胞生長(zhǎng)的血清?
原代或是正常細(xì)胞株建議使用BI特級(jí)胎牛血清,對(duì)生長(zhǎng)條件要求高的細(xì)胞和干細(xì)胞可選用專用特級(jí)胎牛血清,或胚胎干細(xì)胞專用金牌胎牛血清。
由于血清有批間差異,細(xì)胞種類不同,我們建議客戶購(gòu)買前可先申請(qǐng)?jiān)囉脴悠?,通過(guò)篩選得到滿意的血清批號(hào),之后根據(jù)項(xiàng)目需求可進(jìn)行批量囤貨,以保證該項(xiàng)目所需血清質(zhì)量的一致性,可排除不同批號(hào)血清對(duì)于實(shí)驗(yàn)帶來(lái)的影響。
8、除了對(duì)血清進(jìn)行檢測(cè),還有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量呢?
目測(cè)法:我們可根據(jù)血清的顏色,沉淀,澄清度等進(jìn)行區(qū)分。
顏色:顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進(jìn)口血清質(zhì)量好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會(huì)呈現(xiàn)出暗紅色,甚至咖啡色。
沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多,使用時(shí)反復(fù)凍融會(huì)增加沉淀。進(jìn)口血清過(guò)濾分裝前很少反復(fù)凍融,因此成品清澈。
澄清度:進(jìn)口血清是由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。國(guó)產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清,相對(duì)而言更加粘稠,顏色略深。
9、胎牛血清和新生牛血清有什么區(qū)別呢?
取血年齡不同:牛血清按照牛取血時(shí)間或牛齡可進(jìn)行區(qū)分。
a.胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡(jiǎn)稱FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹得來(lái)的胎牛。
b.國(guó)產(chǎn)胎牛血清(并無(wú)明確定義,但通常以此稱)的指的是出生4-6小時(shí),且未進(jìn)行哺乳進(jìn)食的牛,有時(shí)還稱作國(guó)產(chǎn)新生牛。
c.新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡(jiǎn)稱NBCS)指的是出生14天-3個(gè)月進(jìn)行取血的牛。
d.成年牛血清(Adult Bovine Serum,簡(jiǎn)稱ABS)指的是取血時(shí)牛齡通常超過(guò)12個(gè)月的牛。
提示:以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒?guó)家畜牧業(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響,因?yàn)榕Q酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè),并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。
組分與比例不同:這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來(lái)說(shuō),年齡越小的牛血清,細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛,且因?yàn)樘ヅN催M(jìn)食過(guò)母乳,所以IgG含量低。
用途與用法不同:根據(jù)細(xì)胞所需生長(zhǎng)條件可確定。
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