細(xì)胞學(xué)堂 | 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)：揭示細(xì)胞遷移的秘密！

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是一種簡單且經(jīng)濟(jì)的體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法，主要用于評估細(xì)胞在二維空間中的水平遷移能力。它的基本原理是：在細(xì)胞單層上人為制造一道“劃痕”，然后觀察細(xì)胞如何遷移以“修復(fù)”這一劃痕，從而判斷細(xì)胞的遷移能力。這一過程不僅與胚胎發(fā)育過程中器官的形成、機(jī)體傷口的愈合過程、免疫應(yīng)答過程等生理過程緊密相關(guān)，而且在癌癥研究中尤為關(guān)鍵，因?yàn)榘┘?xì)胞的遷移是腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟，這也是實(shí)體瘤患者死亡的主要原因之一^[1]。因此，研究細(xì)胞的遷移行為、評估細(xì)胞的遷移能力意義重大。

1

能模擬體內(nèi)細(xì)胞遷移過程；

2

保留了細(xì)胞外基質(zhì)和胞間連接；

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可與活細(xì)胞成像結(jié)合，實(shí)時(shí)監(jiān)測細(xì)胞遷移過程；

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操作簡單、成本低，適合大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室開展。

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相較其他幾種常用檢測細(xì)胞遷移的實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞長成單層細(xì)胞和劃痕愈合需要較長時(shí)間；

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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)常用培養(yǎng)皿、6孔板或12孔板培養(yǎng)細(xì)胞，這導(dǎo)致細(xì)胞和培養(yǎng)基的使用量較大，對于需要使用難以獲取的原代細(xì)胞或昂貴化學(xué)試劑的實(shí)驗(yàn)不適用；

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在細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)中無法模擬化學(xué)梯度，無法替代Boyden小室法等其他具有趨化性檢測能力的實(shí)驗(yàn)方法。

為了保證在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行圖像采集時(shí)能獲得相同的視野，需事先在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板的底部用極細(xì)的記號筆畫線（如圖1）或使用剃須刀片輕輕蝕刻培養(yǎng)容器底部作為參考點(diǎn)的標(biāo)記。

圖1. 六孔板畫線示意圖