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茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)說明書

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2025年02月28日 14:59  

產(chǎn)品簡介:

茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,兒茶素占60~80%, 具有 C6-C3-C6 碳骨架結(jié)構(gòu),是一種重要的天然抗氧化物質(zhì),能夠清除自由基。類物質(zhì)茶多酚又稱茶鞣或茶單寧,是形成茶葉色香味的主要成份之一,也是茶葉中有保健功能的主要成份之一,研究表明茶多酚等活性物質(zhì)具解毒和抗輻射作用,能有效地阻止放射性物質(zhì)侵入骨髓,并可使鍶90和鈷60迅速排出體外。

茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物,利用茶多酚與酒石酸鐵反應(yīng),生成穩(wěn)定紫藍(lán)色化合物,以分光光度計540nm 處測定吸光度,在一定范圍內(nèi)吸光度與顏色深淺的變化成正比,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較進(jìn)而計算茶多酚含量,主要用   于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考):

1、準(zhǔn)備樣品:

①植物樣品:取 0.2g 植物組織,研磨成粉末,加入煮沸的蒸餾水10ml,沸水浴浸提20min,用200 目細(xì)胞篩過濾,濾渣再繼續(xù)置于新的煮沸的10ml 蒸餾水,相同操作提取一次,合并兩次濾液,5000r/min 離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液,4℃避光保存,用于茶多酚的檢測;綠茶等液體樣本可直接用該試劑盒測定。

②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可直接用本試劑盒測定。

③細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液,如有必要可用蒸餾水進(jìn)行適當(dāng)勻漿,5000r/min 離心 15min,取上清液,即為茶多酚提取液,4℃避光保存。

高濃度樣品:如果樣品中含有較濃度的茶多酚,可以使用蒸餾水進(jìn)行適當(dāng)稀釋。

2、配制系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn):用蒸餾水和茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml),按下表進(jìn)行操作,依次稀釋。


加入物(μl)

1

2

3

4

5

6

茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)

10

25

50

150

250

400

蒸餾水

490

95

450

350

250

100

相當(dāng)于茶多酚含量(μg/ml)

20

50

100

300

500

800


、3.TP 加樣:按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡;如果樣品中的 TP 濃度過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定,樣品的檢測最好能設(shè)置2平行管,求平均值。

加入物(ml)

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

測定管

蒸餾水

0.5

0.25

0.25

系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1~6 號)

0.25

待測樣品

0.25

TP 顯色液

0.5

0.5

0.5

TP Assay Buffer

1.5

1.5

1.5

4、TP 測定:以空白調(diào)零,比色杯光徑 1.0cm,分光光度計測定 540nm 處標(biāo)準(zhǔn)管、測定管的吸光度。

計算:

以系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)濃度(1~6 )(20、50、100、300、500、800μg/ml)為橫坐標(biāo), 以對應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得提取液中 TP 含量。



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