抗體篩選“天選”模式，日篩抗體三千個

抗體篩選是抗體藥物開發(fā)中的關鍵一環(huán)。目前代表性的抗體篩選技術包括雜交瘤技術、轉基因小鼠技術、噬菌體展示技術、核糖體展示技術、單B細胞篩選技術等。

利用合成抗體庫以及從人或動物中分離單個B細胞克隆的抗體發(fā)現流程，在生成了候選抗體庫之后，候選抗體的單獨表達和評估卻往往依賴于勞動密集型程序（例如基于質粒的克隆、轉染、基于細胞的蛋白質表達、蛋白質純化）。篩選過程需要數周至數月的時間，嚴重制約抗體篩選的速度和通量。

代表性抗體篩選技術

無細胞表達抗體示意圖

在抗體篩選方面，CFPS相比于細胞表達系統(tǒng)具有顯著優(yōu)勢：

①無需耗時的基因克隆、轉染、細胞培養(yǎng)流程，從線性DNA片段到候選抗體分子僅需數小時；

②可高通量、自動化合成抗體，可適配高通量移液工作站進行高通量、自動化抗體表達，更節(jié)省人力成本。

基于細胞表達系統(tǒng)與基于CFPS的抗體篩選對比

珀羅汀無細胞抗體篩選，允許以線性化DNA片段作為模板，數小時內表達候選抗體，產物可直接進行ELISA實驗，無需純化。另外，珀羅汀生物無細胞技術允許二硫鍵生成，既可表達VHH、scFv抗體分子片段，也可表達Fab、全長抗體，無抗體種類限制。

單B細胞+CFPS抗體篩選方案

參考文獻：

[1] Lu RM, Hwang YC, Liu IJ, Lee CC, Tsai HZ, Li HJ, Wu HC. Development of therapeutic antibodies for the treatment of diseases. J Biomed Sci. 2020 Jan 2;27(1):1.

[2] Hunt AC, V?geli B, Hassan AO, Guerrero L, Kightlinger W, Yoesep DJ, Krüger A, DeWinter M, Diamond MS, Karim AS, Jewett MC. A rapid cell-free expression and screening platform for antibody discovery. Nat Commun. 2023 Jul 3;14(1):3897.

[3] Ojima-Kato T, Nagai S, Nakano H. Ecobody technology: rapid monoclonal antibody screening method from single B cells using cell-free protein synthesis for antigen-binding fragment formation. Sci Rep. 2017 Oct 25;7(1):13979.