細胞發(fā)生凋亡時,由于胞漿和染色質濃縮、核碎裂,產(chǎn)生凋亡小體,使細胞的光散射性質發(fā)生變化。在細胞凋亡的早期,細胞對前向角光散射的能力顯著降低,對側向光散射的能力增加或沒有變化。在細胞凋亡的晚期,前向和側向光散射的信號均降低。因此可通過流式細胞儀測定細胞光散射的變化觀察細胞凋亡情況。
細胞凋亡檢測試劑盒通常應用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細胞的細胞周期與細胞凋亡檢測。如果用于組織的細胞周期與細胞凋亡檢測,則必須把組織消化成單細胞狀態(tài),才可以進行檢測。
在使用細胞凋亡檢測試劑盒應注意的事項:
1、樣本處理:根據(jù)試劑盒要求,對細胞或組織樣本進行適當處理,如消化、固定、破膜等。
2、熒光染料選擇:若細胞本身帶有熒光,需選擇與細胞自發(fā)熒光不同檢測通道的熒光染料。
3、儀器配置:了解實驗室現(xiàn)有實驗儀器配置,確保能夠準確檢測熒光信號。
4、對照設置:設置適當?shù)膶φ諏嶒灒珀幮詫φ蘸完栃詫φ?,以驗證實驗結果的準確性。
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