肉色明串珠菌的菌株培養(yǎng)與化學(xué)機(jī)理及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容！

肉色明串珠菌，革蘭氏陽性細(xì)菌，是一類不產(chǎn)生孢子，G+C含量低于50%的革蘭氏陽性細(xì)菌，可以在厭氧或有氧條件下生長，通常表現(xiàn)為過氧化氫酶陰性，不水解精氨酸，其細(xì)胞大小為0.5～0.7x0.7～1.2μm。

一、菌種簡介

平臺(tái)編號：Bio-03472

提供形式：凍干物

拉丁屬名：Leuconostoc Carnosum

中文譯名：肉色明串珠菌

拉丁學(xué)名：Leuconostoc carnosum

原始編號：JCM 9695

保藏人：周培瑾

直接來源國家：日本

保藏時(shí)間：3/7/2000

其他保藏編號：=ATCC 49367 =CCUG 30059 =CIP 103319 =DSM 5576 =KCTC 3525 =LMG 11498

生物危害：四類

模式菌株：模式菌株

菌株用途：模式菌株。

培養(yǎng)溫度：30℃

培養(yǎng)基：0006    

其他培養(yǎng)條件

分離源：真空包裝的肉

用途：模式菌株。

注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）

二、化學(xué)機(jī)理

明串珠菌細(xì)胞球狀，直徑0.9—1.2微米，成對、成短鏈或長鏈。在蔗糖溶液中，鏈外常有一厚厚的、膠質(zhì)的無色葡聚糖莢膜，即代血漿（右旋糖酐）。革蘭氏染色陽性，菌落小，灰白，隆起。不液化明膠，發(fā)酵多種糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不還原硝酸鹽，不產(chǎn)吲哚，微好氧或兼性厭氧。此菌是制糖工業(yè)的一種危害菌，常使糖液發(fā)黏稠而無法加工。常存在于水果、蔬菜中，能在含高濃度糖的食品中生長。

三、菌株培養(yǎng)

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純 菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在 上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。

四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1、稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查

2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物

3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查

4、過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌

五、注意事項(xiàng)

1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時(shí)間：細(xì)菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。

2、試管斜面菌種請盡快轉(zhuǎn)接，不建議長期存放。

3、初次使用時(shí)請按照本說明書推薦條件進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng)，如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失，我單位不負(fù)責(zé)任。

4、使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲(chǔ)和操作，帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。

5、菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時(shí)和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系或更換新的菌種。

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