大曲的微生物主要有四類:即霉菌、細菌、酵母菌、放線菌。放線菌為數(shù)不多,在大曲中的作用尚不十分明顯。
1、霉菌
(1)曲霉屬
曲霉是主要的糖化菌,是大曲和其他曲中最多的菌,其時常呈現(xiàn)的顏色有黑、褐、黃、綠、白五色。
曲霉作用于大曲后可形成糖化力、液化力、蛋白質(zhì)分解力和形成多種有機酸。曲霉中的黑曲霉具有多種活力較強的酶系,糖化力較高,并可產(chǎn)生少量的酒精。曲霉的生長和發(fā)酵溫度都在35~40℃之間,其習(xí)性同根霉。
(2)根霉屬
根霉是主要的糖化菌,具有較高的糖化力,且不產(chǎn)轉(zhuǎn)移葡萄糖苷酶,并能產(chǎn)生多種有機酸。根霉分為黑根霉、米根霉、中華根霉、無根根霉幾種。大曲中的根霉以米根霉為主,米根霉除具有較強的糖化力外,還兼有一定的發(fā)酵力。米根霉的生長溫度為37~41℃,但它的發(fā)酵(作用)溫度在30~35℃之間。因此,如制曲培菌品溫不超過38℃即可達到米根霉大量生長繁殖的目的。所以,目前國內(nèi)各香型大曲的前期培養(yǎng)品溫,一般不超過40℃。
(3)毛霉屬
毛霉因其形狀似頭發(fā)狀而得名,與根霉極相似,所需的生長發(fā)酵溫度也差不多。毛霉主要著生于大曲培養(yǎng)的“低溫培菌期”,特別是溫高濕大,兩曲相靠時,更易生長,生產(chǎn)上常常叫做長“水毛”的大多數(shù)就是毛霉。在大曲的微生物區(qū)分中,屬于感染菌,也可以說是有害菌。但毛霉的代謝產(chǎn)物和自身積累的酶系又具有蛋白質(zhì)分解力,因此少量的毛霉對大曲的“綜合能力”可能有一定的作用。
(4)霉菌的作用
霉菌生長代謝能產(chǎn)生多種酶。大曲酒釀造主要利用其代謝產(chǎn)生的液化型、糖化型淀粉酶,作為生產(chǎn)發(fā)酵中的糖化劑。
能代謝產(chǎn)生淀粉酶的霉菌有:根霉、曲霉、毛霉等。其中尤以根霉曲霉產(chǎn)生的淀粉酶活力,以此為主體的大曲糖化、液化力也較強。大曲生長的霉菌種類和數(shù)量受培曲溫度的影響。培養(yǎng)溫度高,液化能力高,糖化力低;培養(yǎng)溫度低,液化力低,糖化力高。
霉菌,特別是毛霉,還能產(chǎn)生一種活性較強的蛋白質(zhì)分解酶。此酶能催化原料中的蛋白質(zhì)分子水解為朊、胨、多肽,最后分解形成氨基酸。
2、細菌
有一種說法:糖化動力——霉菌,發(fā)酵動力——酵母菌,生香動力——細菌??梢娂毦卺劸浦械淖饔?。細菌主要有濃香型白酒中的己酸菌、甲烷菌及丁酸菌;醬香型白酒中的耐高溫芽孢桿菌,產(chǎn)乳酸、醋酸、丙酸等有機酸的細菌等。大曲中的細菌主要是球菌和桿菌兩種類型,最多的是乳酸菌。
(1)乳酸菌屬
大曲中的乳酸菌有三個顯著特點:一是既有純型(同型的),又有異型的;二是球菌居多,占70%;三是所需溫度偏低,在28~32℃之間,并具有厭氣和好氣雙重性。大曲中乳酸菌含量不可過多,主要生成區(qū)域是在高溫轉(zhuǎn)化時由乳酸菌作用于已糖同化生成乳酸,其量的大小往往取決于大曲中乳酸菌的數(shù)量和大曲生產(chǎn)發(fā)酵對品溫的控制。特別是頂點品溫不足,熱曲時間短時,更會使乳酸大量生成。
乳酸含量的多少是反映曲質(zhì)的一個方面,由于乳酸所呈現(xiàn)的味是餿、酸、澀等,特別是乳酸在量大時又呈青草味,因此在釀酒上帶來的危害就大。一般來說,大曲酒中乳酸及其酯都偏多,所以“增己降乳”應(yīng)先考慮大曲的“降乳”。
(2)醋酸菌屬
醋酸菌的形態(tài)各異,但在大曲中以桿菌居多,且是典型的好氣性菌。它的作用主要是氧化葡萄糖生成醋酸和少量酒精。它的發(fā)酵溫度是30℃,偏酸環(huán)境。醋酸的功過取決于其含量的大小,在一定量時,它是與醇合成酯的必要成分;當其量大時,不但會使酒味變異,更主要的是它會抑制酵母菌的生長。
醋酸菌主要是在大曲發(fā)酵前、中期生長繁殖,尤其是在新曲中含量最多。醋酸菌有一個致命的弱點是干燥低溫的環(huán)境下芽孢會失去發(fā)芽能力。所以,在制備大曲時,要求新曲必須貯存3個月或半年以上,可以使醋酸菌以最少的數(shù)量進入釀酒階段。
(3)枯草芽孢桿菌
枯草芽孢桿菌是大曲中數(shù)量最多的細菌之一,它有厭氣和好氣兩種類型,一般生長溫度為37℃,適應(yīng)于微酸、濕度大的環(huán)境。初期,大曲中芽孢桿菌不多,但其繁殖速度較快,特別是在大曲的高溫、高水份、曲塊軟的區(qū)域繁殖較快,此時枯草芽孢桿菌得以大量生長。
(4)細菌的作用
乳酸菌,具有乳酸脫氫酶和乳酸消旋酶,能進行同型和異型乳酸發(fā)酵,一般以同型乳酸發(fā)酵為主,將葡萄糖經(jīng)由HDP途徑代謝,產(chǎn)生乳酸。
醋酸菌形成的酶具有較強的氧化能力,能利用葡萄糖生產(chǎn)葡萄糖酸,也能氧化乙醇生成乙酸,是發(fā)酵酒醅中乙酸的主要產(chǎn)生菌。
芽孢桿菌具有水解淀粉和蛋白質(zhì)的能力,有的芽胞桿菌能代謝產(chǎn)生酒中的芳香成分雙乙酰等。產(chǎn)氣芽孢桿菌都有較強的V·P反應(yīng)(乙酰甲基甲醇反應(yīng)),與酒中2,3-丁二醇、雙乙酰等香味物質(zhì)的生成有關(guān)。
3、酵母菌
(1)酒精酵母
酒精酵母是大曲的主要酵母,其主要特點是生長作用溫度低,酒精生成能力強,喜偏酸環(huán)境生長,生長溫度為28~32℃,pH值在4.5~6.2之間。酵母菌一般在曲坯入房2天(48h)便大量生長繁殖了,其后隨著品溫的上升而死亡或休眠。酒精酵母與其他酵母相比其數(shù)量不算多,但在釀酒上是的,而且對大曲、大曲酒的產(chǎn)品質(zhì)量起著決定性的作用。
(2)產(chǎn)酯酵母
產(chǎn)酯酵母能以糖、醛、有機酸、鹽類等作為養(yǎng)料,在酯化酶作用下將乙酸與乙醇結(jié)合成乙酸乙酯或其他酸酯,所以又把它稱為生香酵母。正因為其主要作用是酸醇結(jié)合而產(chǎn)生酯,所以該酵母的發(fā)酵力不強。其生活習(xí)性和所需的生長環(huán)境和酒精酵母類似。
(3)假絲酵母屬
假絲酵母屬包括有產(chǎn)假絲酵母、解酯假絲酵母、熱帶假絲酵母等。
假絲酵母有很多種都具有酒精發(fā)酵能力,它與擬內(nèi)孢霉共同存在于大曲的表面層,通常呈現(xiàn)為黃色的小斑點。由于其所需溫度較低,故主要在“低溫培菌期”存活繁殖,當大曲進入高溫轉(zhuǎn)化期時,就隨其他酵母轉(zhuǎn)入休眠或死亡。
(4)酵母菌的作用
酵母菌在發(fā)酵釀酒過程中,具有兩個十分突出的作用,即酒化和酯化作用。大曲中的酒精酵母能產(chǎn)生活力較強的酒化酶,能將葡萄糖通過EMP途徑代謝轉(zhuǎn)化成酒的主要成分——乙醇,這是曲酒最重要也是最基礎(chǔ)的物質(zhì)。
產(chǎn)酯酵母具有較強的酯合成能力,能代謝產(chǎn)生大量的酯類物質(zhì),能賦予大曲酒濃郁的芬芳。
酵母菌代謝還能產(chǎn)生許多物質(zhì),如甘油和其它多元醇等,對酒體的與豐滿有著重要的作用。
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