大鼠原代乳腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)條件如下:
培養(yǎng)基成分:通常使用含胎牛血清(FBS)、生長(zhǎng)添加劑、青霉素(Penicillin)和鏈霉素(Streptomycin)的專用培養(yǎng)基。這些成分能夠?yàn)榧?xì)胞提供必要的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子,同時(shí)防止細(xì)菌污染。
培養(yǎng)環(huán)境:
溫度:37℃。
氣體條件:95%空氣 + 5%二氧化碳(CO?)。這種氣體環(huán)境有助于維持培養(yǎng)基的pH值穩(wěn)定,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。
包被條件:為了增強(qiáng)細(xì)胞的貼壁性,培養(yǎng)器皿表面常需進(jìn)行包被處理。常用的包被材料包括鼠尾膠原Ⅰ(濃度為2-5μg/cm²)、多聚賴氨酸(PLL,0.1mg/ml)或明膠(0.1%)。
換液頻率:建議每2-3天更換一次新鮮培養(yǎng)基,以提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并去除代謝廢物,維持細(xì)胞健康生長(zhǎng)。
傳代比例與方法:
傳代比例:一般按1:2的比例進(jìn)行傳代。
消化液:使用0.25%胰蛋白酶進(jìn)行消化,使細(xì)胞從培養(yǎng)器皿表面脫離。
操作:消化后,需輕輕吹打細(xì)胞,使其成為單細(xì)胞懸液,然后進(jìn)行離心、重懸,并接種到新的培養(yǎng)器皿中。
大鼠原代乳腺上皮細(xì)胞生長(zhǎng)特性:
生長(zhǎng)方式:貼壁生長(zhǎng)。
細(xì)胞形態(tài):呈上皮細(xì)胞樣,多角形。
傳代代數(shù):由于是原代細(xì)胞,體外培養(yǎng)周期有限,一般可傳1-2代。
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