大鼠胃動素ELISA試劑盒使用說明書

大鼠胃動素ELISA試劑盒使用說明書

公司立足于生命科學(xué)領(lǐng)域，全力打造高品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈，立志成為生命科學(xué)研究領(lǐng)域的問題解決專家。

“的產(chǎn)品、周到的服務(wù)”是公司的核心理念；

“協(xié)同發(fā)展，多元共贏”是公司的價值觀；

“以客戶需求為中心，以一整套的服務(wù)與產(chǎn)品來滿足客戶的需求”是公司的運營模式。

 （用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)） 用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）
大鼠ELISA試劑盒原理
本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA 法。用抗大鼠 Motilin 單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中 的 Motilin 與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗大鼠 Motilin，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo) 記的 Streptavidin 與生物素結(jié)合， 加入底物工作液顯藍色， zui后加終止液硫酸， 在450nm 處測 OD 值， Motilin 濃度與 OD 值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中 Motilin 濃度。
試劑盒組成（2-8℃保存） 劑盒組成（ ℃保存）
酶標(biāo)板（Coated Wells） 10×標(biāo)本稀釋液（Sample Buffer） 標(biāo)準(zhǔn)品（Standards） ：40ng/瓶 96孔 12ml 2瓶 酶標(biāo)抗體工作液（Enzyme Conjugate） 20×濃縮洗滌液（Wash Buffer） 底物工作液（TMB Solution） 終止液（Stop Solution） 12ml 50ml 12ml 12ml
*抗體工作液 （Biotinylated Antibody） 12ml
準(zhǔn)備試劑與收集血樣
1. 收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝） 、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20 ℃或-70 ℃）保存，避免反復(fù)凍融。 2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml 蒸餾水混勻，配成40ng/ml 的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，*管加標(biāo)本 稀釋液900ul， 第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。 在*管中加入40ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul 混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul 棄去。 第八管為空白對照。 3. 10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml 濃稀釋液+9ml 蒸餾水） 。 4. 洗滌液：用重蒸水 重蒸水1:20稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入19ml 的重蒸水） 重蒸水
大鼠elisa試劑盒檢測程序
1. 加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。 2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。 3. 每孔中加入*抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。 4. 洗板：同前。 5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。 6. 洗板：同前。 7. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗處反應(yīng)15分鐘。 8. 每孔加入100ul 終止液混勻。 9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm 處測吸光值。
結(jié)果計算與判斷
1. 所有 OD 值都應(yīng)減除空白值后再行計算。 2. 以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0 pg/ml 為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐 標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。 3. 根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應(yīng) Motilin 含量。